大鼠垂体功能影响研究
宋 俐
（）湖北中医药大学，湖北武汉４３００６５
摘 要：多囊卵巢综合征是育龄期妇女常见生殖内分泌紊乱性疾病，临床上以持续无排卵、高雄激素血
症和胰岛素抵抗为特征，是女性无排卵性不孕的主要原因之一。下丘脑－垂体－卵巢轴调节功能异常是其主要发病机制之一。固本祛瘀方是黎烈荣教授治疗ＰＣＯＳ的经验方。本实验表明固本祛瘀方对
能降低垂体释放ＬＨ水平，其治疗作用可能是通过调节垂体细胞释放ＰＣＯＳ大鼠垂体系数无明显影响，与垂体形态及细胞多少无明显联系。ＬＨ功能而起效，
）；关键词：多囊卵巢综合征（固本祛瘀方；垂体系数；ＰＣＯＳＰＣＯＳ模型
（）中图分类号：Ｒ２８５．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３２１９７２０１２０３０００８０２－－－是育龄期妇女常见生殖内分ＰＣＯＳ） 多囊卵巢综合征（
临床上以持续无排卵、高雄激素血症和胰岛泌紊乱性疾病，
素抵抗为特征。下丘脑－垂体－卵巢轴调节功能异常是其主要发病机制之一。固本祛瘀方是黎烈荣教授治疗ＰＣＯＳ的经验方。临床观察表明，固本祛瘀方能降低ＰＣＯＳ患者／雄激素水平，降低ＬＨ水平及ＬＨ有效调节月ＦＳＨ比值，经周期，促进排卵，提高妊娠率。本实验旨在研究固本祛瘀垂体释放ＬＨ水平等方面的影方对ＰＣＯＳ大鼠垂体系数、响，探讨其作用机制。
１ 材料
１．１ 实验动物
雌性Ｗ与母鼠一起购买。饲养于１ｉｓｔａｒ新生幼鼠，２ｈ光照／母鼠自由摄食和饮水。动物的处１２ｈ黑暗的环境中，
理符合国际实验动物使用准则。
１．２ 主要试剂及仪器
（。Ｓ北京福瑞生物工程公司）ＬＨ放射免疫检测ＫｉｔＮ－。上海日环光电仪器有限公司）６９５放免测定仪（
２．２ 药物剂量与方法
固本祛瘀方由菟丝子、黄芪、当归、肉苁蓉、淫羊藿、红花、苍术、川芎、地龙等１由本院制剂室按特２味中药组成，定工艺流程煎制、浓缩，制成浓缩液。２℃～８℃条件下保存备用。通过人与大鼠体表面积比率换算法计算出给药量为
／／上海复旦复３５．５ｋｍＬ。西药阳性对照药物为氟他胺（ｇｇ
，／片），华药业有限公司，国药准字Ｈ规格２１０９５０２２０５０ｍｇ
／／相当于２５０ｍｋｍＬ比例于灌胃前配制成溶液。固本祛ｇｇ
瘀组与西药对照组大鼠每日灌胃给药，每次１早晚各ｍＬ，
，连续４周。１次／ｄ２．３ 垂体重量及垂体系数计算各组大鼠称重后断头处死，迅速置于冰浴的消毒玻璃培养皿内，打开颅骨取出全脑，从垂体窝中小心分离垂体。在预冷消毒的塑料膜上，用精密扭力天平称重。垂体系数
）／大鼠１＝垂体质量（ｍ００ｇｇ体重。２．４ 垂体组织离体静态孵育［］［］
参照Ｇｉｌｌ等１和Ｓｕｚｕｋｉ等２的方法并加以改进。将各组６只大鼠断头处死，分离垂体称重后，在预冷消毒的塑料
，膜上用刀片将垂体分成几等份（每片约３用孵００～４００ｍ）μ，育液（人工脑脊液，含０．用前加ｌｕｃｏｓｅ１％ＢＳＡ和１０ｍＭ ｇ
入杆菌肽，调ｐＨ值到７．２，０．２２ｍ微孔滤膜过滤除菌）冲μ洗３次后，分别放入灌流装置和２４孔培养板的小孔中。所有孔洞预先加入２在３００Ｌ孵育液，７℃的５％Ｏ５％２和９μ
。垂体切片放入后，平衡ＣＯ０ｍｉｎ２细胞培养箱中预热１
，收集孵育液，更换新的孵育液。垂体孵育２再３０ｍｉｎｈ后，次收集孵育液。然后在孵育液中加入５６ｍＭ ＫＣｌ２００Ｌ孵 μ
，育４收集孵育液。各期收集的样品置于－５ｍｉｎ８０℃保存待
测。
２ 方法
２．１ 实验动物分组
幼鼠２断奶与母鼠分离。随机分为四组，每１日龄时，组６只：①正常对照组；②模型对照组；③西药对照组；④固本祛瘀组。模型对照组、西药对照组和固本祛瘀组大鼠颈
，相当于部埋植双氢睾酮缓释片剂（ＤＨＴ，７．５ｍ９０天缓释，ｇ
／，，每天释放８１．６６ｍｋ３ＩｎｎｏｖａｔｉｖｅＲｅｓｅａｒｃｈｏｆＡｍｅｒｉ －ｇｇｇμ，，制备ＰｃａＳａｒａｓｏｔａＦＬ，Ｕ．Ｓ．Ａ）ＣＯＳ大鼠模型。西药对照组与固本祛瘀组大鼠于造模后６周，即大鼠６开始４日龄起，分别灌胃给药，连续治疗４周。各组大鼠９１日龄取材。
收稿日期：２０１１１２２４－－，作者简介：宋俐（女，湖北中医药大学讲师，研究方向为中医药防治妇科疾病。１９７６－）
—８—
２．５ 放射免疫法检测垂体ＬＨ释放水平变化
参照垂体组织离体静态孵育的方法，将各组大鼠断头处死后，迅速分离垂体。收集孵育液检测。ＬＨ的测定采用特异性的Ｒ按试剂盒说明书操作。ＩＡ试剂盒，２．６ 统计方法
珚）各组数据均以均数±标准差（表示。多组间数据ｘ±ｓ
统计采用单因素方差分析（进行比较，继ｏｎｅａＡＮＯＶＡ）－ｗｙ 以Ｓｔｕｄｅｎｔｅｗｍａｎｅｕｌｓ检验。两组间数据比较采用ｔ检－Ｎ－Ｋ验。数据用ＳＰＳＳ１９．０软件处理。Ｐ＜０．０５为差别有统计学意义。
平。固本祛瘀组、西药对照组大鼠垂体释放ＬＨ水平与模
显著性差异（型对照组比较分别有非常显著性、Ｐ＜０．０１、Ｐ，两组大鼠垂体释放ＬＨ水平明显低于模型对照０５）＜０．
组。提示：经过治疗固本祛瘀组ＰＣＯＳ大鼠垂体释放ＬＨ水平有一定程度降低，但尚未恢复正常水平。
４ 讨论
月经稀发、闭经、功能性子宫出血ＰＣＯＳ以月经失调（等）、不孕、肥胖、多毛等为主要临床表现，属于中医学“月经
、“、“、“、“、“后期”月经过少”闭经”崩漏”不孕症”癥瘕”等范畴。固本祛瘀方是导师黎烈荣教授治疗ＰＣＯＳ的经验方，
，黎教授针对本病的基本病机“肾脾气虚，痰瘀阻滞”以标本兼治为则，以补肾健脾，祛瘀化痰为法，拟定本方。“固本”
“即为固护先、后天之本，祛瘀”概指祛除病邪。临床观察表明，固本祛瘀方能降低Ｐ降低ＬＨ水ＣＯＳ患者雄激素水平，
／平及ＬＨ有效调节月经周期，促进排卵，提高妊ＦＳＨ比值，娠率。
ＰＣＯＳ临床重要病理特征为内分泌紊乱和代谢障碍。
ＨＰＯＡ功能异常是目前国内外研究者公认的ＰＣＯＳ重要发病机制之一。ＰＣＯＳ患者垂体分泌ＬＨ的频率及幅度增加，ＬＨ无周期性改变及峰值出现。过多的ＬＨ分泌促使多囊性卵巢合成更多的雄激素，使卵泡及其卵子发育停滞或延迟，表现出闭经或月经稀发。本实验结果表明，固本祛瘀方对Ｐ但能明显降低垂体释ＣＯＳ大鼠垂体系数无明显影响，放ＬＨ水平，其治疗作用可能是通过调节垂体细胞释放ＬＨ功能而起效，与垂体形态及细胞多少无明显关系。参考文献：
［］１ＩＬＬ Ｍ．Ｋ，ＫＡＲＡＮＴＨＳ，ＤＵＴＴ Ａ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｃａｓｔｒａ Ｇ －ｏｎａｄｏｔｒｏｉｎｓｔｉｏｎａｎｄｓｔｅｒｏｉｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｎｔｈｅｒｅｌｅａｓｅｏｆｂｇｐ ｙ
］，ｉｔｕｉｔａｒｈｏｔｈａｌａｍｕｓｉｎｉｔｒｏ［Ｊ．Ｈｏｒｍ．Ｍｅｔａｂｏｌ．Ｒｅｓ．ｒａｔ － ｐｙｙｐ１９８５，１７：１４１１４６．－［２］ＵＺＵＫＩＲ，ＫＩＳＨＩＤＡ Ｍ，ＨＩＲＡＮＯＴ．Ｇｒｏｗｔｈｈｏｒｍｏｎｅ Ｓ
ｓｅｃｔｉｏｎｉｔｕｉｔａｒｄｕｒｉｎｌｏｎｔｅｒｍｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｏｆｔｈｅｐｙ － ｇｇ
［］，ＪａａｎｅｓｅＪ．ＦｉｓｈＰｈｓｉｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９０，８：１５９１６５． －ｐｙ
３ 结果
３．１ 固本祛瘀方对ＰＣＯＳ大鼠垂体系数的影响
珚（）表１ 各组大鼠垂体系数ｘ±ｓ
组别正常对照组模型对照组西药对照组固本祛瘀组
例数
体重（克）
垂体重量（毫克）
垂体系数２．８０±１．３２１．９５±０．６２２．３２±０．７５
６２０．４８±６．８１１７±２．９３ ２ ６． ６２４．００±１２．６７ ２
６１２．４７±２５．０４ ２
＃＃＃＃
６４７±１．０６７５．３５±１３．２７＊＊４．６２±０．３５＊ ２ １．
４．３６±１．１４ ４．８３±１．３６
＊＊＊，注：Ｐ＜０．０５Ｐ＜０．０１ｖｓ正常对照组；＃＃Ｐ＜０．０１ｖｓ模型对照组。
如表１所见，固本祛瘀组垂体重量、垂体系数与各对照
）。提示：组比较均无统计学差异（固本祛瘀方对ＰＰ＞０．０５－ＣＯＳ大鼠垂体系数无明显影响。
而模型对照组大鼠垂体系数与正常组比较有显著性差
），异（模型对照组大鼠垂体系数明显低于正常对照Ｐ＜０．０５造模方法对大鼠垂体系数有明显影响。组。提示：
３．２ 固本祛瘀方对ＰＣＯＳ大鼠垂体释放ＬＨ水平的影响
珚（）表２ 各组大鼠垂体释放ＬＨ水平ｘ±ｓ
组别正常对照组模型对照组西药对照组固本祛瘀组
例数６ ６ ６ ６
／ＬＨ（ｍＩＵｍＬ）１９１．７５±１０．６３４６２．５２±１２１．２０＊＊３８１．８５±２８．４６＊＊＃３３５．９０±４４．２９＊＊＃＃
＊＊＃＃＃，注：Ｐ＜０．０１ｖｓ正常对照组；Ｐ＜０．０５Ｐ＜０．０１ｖｓ模型对照组。
如表２所见，固本祛瘀组、西药对照组、模型对照组大鼠垂体释放ＬＨ水平与正常对照组比较均有非常显著性差
），异（三组大鼠垂体释放ＬＨ水平明显高于正常水Ｐ＜０．０１
（责任编辑：姜付平）
—９—
因篇幅问题不能全部显示，请点此查看更多更全内容