药理实验

试剂 0.6%醋酸 阿司匹林（配成50mg/ml）

2 方法 牛磺酸镇痛作用研究 小鼠40 只( 雌雄各半) , 随机分为5 组, 其中第1 组为对照组,灌胃生理盐水; 第2 组为阿司匹林组, 灌胃阿司匹林; 第3、4、5组为牛磺酸组, 分别灌胃含20、10、5 g/ L 牛磺酸的生理盐水。各组给药剂量均为0. 1 mL/ 10 g 体重。各组小鼠给药45 min( 阿司匹林组1 h) 后, 腹腔注射0. 5 g/ L 0.6%醋酸( 0. 2 mL/ 只) , 观察小鼠产生扭体反应( 腹部凹陷, 躯后腿伸直, 臀部高起) , 记录15 min 内扭体次数, 将给药组与对照组相比，以给药后扭体次数减少50% 为有效镇痛作用指标, 计算药物对扭体反应的抑制率。

抑制率= ( 对照组平均扭体次数- 给药组平均扭体次数) / 对照组平均扭体次数× 100%

【实验结果】将结果记录于下表中，综合数据，计算抑制率

牛磺酸颗粒对醋酸诱发小鼠扭体反应的镇痛效果，见下表： 组别 生理盐水 阿司匹林组 20g/L牛磺酸组 10g/L牛磺酸组 5g/L牛磺酸组 N 8 8 8 8 8 扭体次数 （均值 ± 标准差） 29.38±14.918 14.625±7.463 28.75±18.622 44±19.228 49±12.271 标准误 16.90 8.39 13.18 27.93 38.74 ＊注：与空白对照组比较，P<0.05

P=0.001 方差不齐 Tamhane分析②③④⑤与①无显著性差异，②与④ ②与⑤有显著性差异

【结果分析】：从实验所得的数据看出给药组与生理盐水组之间没有显著性差异也就是所给的药没有作用，作为阳性对照的阿司匹林也没有镇痛作用，而阿司匹林是经典的解热镇痛药，说明实验从在较大的误差。分析可能的原因有以下几点：1)小鼠本身的个体差异，不同的小鼠对醋酸的反应程度和对药物的吸收速度及程度都有所差异导致误差。2）在记录小鼠扭体次数时，每人观察两只小鼠，不同的人之间评价扭体标准不同也可能从在误差。

（二）热板法

【实验原理】 热板法制备疼痛模型是指利用一定温度刺激动物躯体的某一部位以产生疼痛反应。实验时，把小白鼠放在预先加热到55℃金属板上，以舔后足作为“疼痛”反应指标，以产生痛反应所需的时间为痛阈值。给药后痛反应时间延长一倍以上者作为有效镇痛药物。

【实验材料】

小白鼠（雌性）40只 药品同上 YLS-6A智能热板仪

【实验方法与步骤】

1. 药物配制 20、10、5 g/ L 牛磺酸的生理盐水，阿司匹林（配成50mg/ml） 2. 筛选小鼠，测定正常痛阈

调节热板温度至55±0.5℃，将小鼠放在热板上用秒表记录时间，密切观察小鼠反应，以舔后足为痛觉指标。记录痛阈时间值（从小鼠放上热板到出现舔后足）即药前痛阈s。筛选痛阈值在10～30秒的小鼠作为供实验的合格小鼠，筛选40只，并称重，然后随机分为5组，用苦味酸标记编号。 3. 给药并测定各时间点痛域值

A: 牛磺酸组 三种剂量依次在灌胃给药（0.1ml/10g）后5,15,30,60min时各测定一次痛域，对60s内不舔后足的小鼠立即取出，痛阈按60s计算。 B:生理盐水组 在灌胃给药（0.1ml/10g）后按上组同样的方法测定痛阈 C:阿司匹林组 在灌胃给药（0.1ml/10g）后按上组同样的方法测定痛阈

【结果与分析】

将结果记录于下表

1. 牛磺酸颗粒对小鼠热板法镇痛的影响，见下表：

组别

痛阈时间（s）x±s

给药前 16.8088±1.78113 16.9000±4.11697 17.2138±4.67416 14.5400±2.84511 14.7888±4.31733

5min 18.0788±10.67625 13.1213±5.30523 16.3725±3.91848 23.0150±7.34148 15.3525±5.20213

15min 15.8388±8.74146 15.0938±4.91763 15.5050±4.69725 18.0337±2.49664 16.4350±6.49376

30min 17.9700±17.59648 11.7725±5.13700 16.0825±6.12259 19.4525±7.05223 18.5412±9.23858

60min 19.3038±16.94462 16.7075±4.13483 17.6387±6.02445 21.8800±6.75347 19.8600±10.54610

生理盐水 20g/L牛磺酸组 10g/L牛磺酸组 5g/L牛磺酸组 阿司匹林组

＊注：与空白对照组比较，P<0.05

给药前：P=0.447 ，方差齐，经LSD分析组间无显著性差异 5min后：P=0.076 方差齐，经LSD分析②③④⑤与①均无显著性差异 ②与④有显著性差异 15min后：P=0.871 方差齐，经LSD分析②③④⑤与①均无显著性差异 30min后: P=0.576 方差齐，经LSD分析②③④⑤与①均无显著性差异 60min后: P=0.859 方差齐，经LSD分析②③④⑤与①无显著性差异.

【结果分析】：从结果看给药组与生理盐水组没有显著差异，即药物没有镇痛作用，有的组在给药后不同时间出现痛阈时间反而缩短，药理作用不能看出，阿司匹林组在给药后痛阈值增大，阿斯匹林是经典药物药效明显。分析作用不明显原因可能有以下几点：1）使用的热板仪灵敏度不好，小鼠放入时间与计时时间不一致导致的误差。 2）在操作过程中，一人放小鼠，一人按计时器，两人之间的误差。 3）在试验后半部分，用两台机器分别测痛阈，也会存在误差。 4）小鼠的个体差异对药物的吸收也有不同等。

牛磺酸对小鼠抗炎作用研究

【实验目的】：1学会采用小鼠耳廓肿胀法制备抗炎模型而筛选抗炎药

2比较牛磺酸与阿司匹林片的抗炎作用

【实验对象】 动物：雄性小鼠，体重20g左右，40只

【实验药品与器材】

受试药品：牛磺酸 阿司匹林（配成50mg/ml） 试剂： 二甲苯 苦味酸 生理盐水。

仪器：电子天平 直径9mm 打孔器 剪刀 注射器 针头5号

【方法与步骤】

1． 雄性小鼠40只，随机按下表分组，

A，20g/L牛磺酸组 给药方式灌胃 0.1ml/10g B: 10g/L牛磺酸组 给药方式灌胃 0.1ml/10g C: 5g/L牛磺酸组 给药方式灌胃，0.1ml/10g D: 生理盐水对照组，给药方式灌胃 0.1ml/10g E: 阿司匹林组 给药方式灌胃 0.1ml/10g

2. 给药2小时后，取二甲苯0.02ml/只，右耳面前后均匀涂抹二甲苯，0.5h后处死小鼠，剪下双耳，用直径9mm 打孔器打下双耳同一部位耳片，分别于电子天平(感量0．1mg)称重，求出各组动物耳廓的肿胀度(肿胀度=右耳片重量一左耳片重量。

3. 【实验结果及分析】

将实验结果填入下表后，处理并分析

牛磺酸颗粒对小鼠耳肿胀的影响，见下表： 组别 生理盐水 阿司匹林组 20g/L牛磺酸组 10g/L牛磺酸组 5g/L牛磺酸组 N 8 8 8 8 8 耳肿胀度 （均值 ± 标准差） 0.0164375±0.0100775 0.0076125±0.0073396 0.011425±0.0064362 0.015525±0.0081550 0.0085±0.005173 标准误 0.003562951 0.002594943 0.002275549 0.002883249 0.001829032 ＊注：与空白对照组比较，*P<0.05

P=0.089 方差齐，经LSD分析②、⑤组与①有显著性差异，且②与⑤无显著性差异，②与④有显著性差异

【结果分析】：结果5g/L的牛磺酸组与阿司匹林组有抗炎作用，而二者之间没有显著性

差异，说明实验还是存在误差，分析原因：1）涂二甲苯时不同的操作者涂的量不同，耳朵的肿胀程度不同 2）打孔器打耳朵是不同人操作、同一人打左右两耳位置不同也存在误差 3）小数的个体差异对药物的吸收不同也会出现误差。

参考文献:

[ 1] 鲍建民. 牛磺酸的生物功能研究进展[ J] . 食品与药品, 2006, 8 ( 5) : 1820.

[ 2] 刘 辉, 金玉兰, 徐应军, 等. 牛磺酸研究的进展[ J] . 国外医学:妇幼保健分册, 2002, 13( 1) : 4041.

[ 3] 杨志勇, 冯 颖, 吕秋凤, 等. 牛磺酸与生殖[ J ] . 饲料工业,2008, 29( 11) : 20 22.

[ 4] 李金芳, 周荫庄, 屠淑洁. 牛磺酸对细胞的保护作用[ J] . 首都师范大学学报, 2006, 27( 1) : 6366.

[ 5] 张文革, 王 勇, 胡建民, 等. 牛磺酸对大鼠大脑突触结构的影响[ J ] . 中国兽医学报, 2006, 26( 1) : 69 71.

实验心得

一周的药理实验结束了，现在回想起来有甜也有苦，高兴的是和同学以及我们可爱的小老鼠们一起度过了一个星期，这一个星期里和同学讨论到底该研究什么，用什么方法等常常大家争得面红耳赤的，不过现在回想起来却是如此的甜美！经过这一次亲自定课题、亲自做实验，让我感受了很多，学到了很多，也为我能成为一名药学专业的学生而感到自豪！同时也敬佩那些研究者，因为通过这次设计性实验，我清楚的明白一项研究的成功不会像我们这样简单的一次实验就行了的，要经过几百次、几千次甚至无数次的实验，让我知道什么叫做“屡败屡战”、“坚持不懈”、“永不放弃”等词。

在我的脑子里一直都没有“发现”、“发明”这两个词的概念，取而代之的应该是“好吃懒做”、“守株待兔”吧！我一直都认为世上的这一切都是上帝赏赐的，不需要什么人去研究发现。但这一次研究性实验却像给我洗脑了一样，让我明白这个世界上一直有许许多多的人在默默无闻的工作着，在为我们的幸福健康的生活默默奉献着！

虽然说我们做实验，结果对我们来说很重要，可以说是一锤定生死，但是这次设计性实验却有所不同，不同就在于过程比结果更有意义。原因就是我们可以运用书上我们曾学的知识应用于我们的实验当中，比老师在讲台上讲我们在下面听有意义多了。这样一种新的学习方法不仅增强了我们的组织能力，同时也增强了我们的动手能力，不用再死读书，老师叫我们干什么就干什么，完全通过我们认真的思考、下去查资料完成。

这样的学习方式让我有很大的成就感，也增加了浓厚的兴趣，对我的条理也有重要的理清作用 ,同时也使我对药理学有了更深层次的认识。知道药理对人体非常重要，就像一位卫士时刻守护着我们，同时也需要我们去发掘他们的潜力。

在广阔的药理学海洋里，我们学到的微不足道，因此我会更加努力学习！