双氯芬酸钾双层片的体外释放度及其在家犬体内的药动学研究

第２１卷第２期　２００５年４月　广东药学院学报　Ｖｏ１．２１　Ｎｏ．２　Ａｐｒ．２００５　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＧＵＡＮＧＤ０ＮＧ　ＣＯＬＬＥＧＥ　ＯＦ　ＰＨＡＲＭＡＣ￣ｔ　双氯芬酸钾双层片的体外释放度及其在家犬体内的药动学研究　符旭东　汤　韧（广州军区武汉总医院药剂科　湖北武汉４３００７０）　摘要目的考察双氯芬酸钾（ＤＰ）双层片的体外释药行为和在家犬体内的药动学特征。方法采用转篮法测定ＤＰ双层片　（Ｉ）、缓释片和速释片的体外释放度。采用高效液相色谱法测定３只家犬分别单剂量口服ＤＰ双层片（Ｉ）、缓释片（Ⅱ）和市　售普通片（Ⅲ）各５０　ｍｇ后的血药浓度，经３Ｐ９７程序拟合，求算药动学参数。结果双层片中的速释层能够快速崩解，０．５　ｈ的　释放可以达到３０％，随后缓释层缓慢释药１２　ｈ左右。（Ｉ）和（Ⅱ）相对于（Ⅲ）的生物利用度分别为１０６．１４％和１０２．９０％　（Ｉ）和（Ⅱ）的Ｃ…、ｔ　、ＭＲＴ差异无显著性，（Ｉ）的　关键词中图号双氯芬酸钾；双层片；高效液相色谱法；药动学　Ｒ９６９．１　文章编号：１００６—８７８３（２００５）０２—０１２６—０２文献标识码：Ａ　明显低于（Ⅱ），与（Ⅲ）差异无显著性。结论　（Ｉ）在体内和体外均　具有明显的缓释和速释特征，（Ｉ）、（Ⅱ）、（Ⅲ）在家犬体内的吸收程度等效　Ｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｄｏｕｂｌｅ－ｌａｙｅｒ　ｔａｂｌｅｔｓ：ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｒｅｌｅａｓｅ　ａｎｄ　ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ　ｉｎ　ｄｏｇｓ　ＦＵ　Ｘｕ—ｄｏｎｇ，ＴＡＮＧ　Ｒｅｎ　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，Ｗｕｈａｎ　Ｇｅｎｅｒａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｆＧｕａｎｇｚｈｏｕ　Ｍｉｏｌｉｔａｒｙ　Ｃｏｍｍａｎｄ，Ｗｕｈａｎ　４３００７０，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｐｒｏｆｉｌｅ　ｏｆ　ｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｄｏｕｂｌｅ—ｌａｙｅｒ　ｔａｂｌｅｔ（Ｉ）ａｎｄ　ｓｔｕｄｙ　ｉｔｓ　ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ　ｉｎ　ｄｏｇｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ａ　ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｔｅｓｔ　ｗａｓ　ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　Ｉ．ｓｕｓｔａｉｎｅｄ—　ｒｅｌｅａｓｅ　ｔａｂｌｅｔｓ（ＩＩ）ａｎｄ　ｏｒｄｉｎａｒｙ　ｔａｂｌｅｔｓ（１１Ｉ）．Ａ　ｓｉｎｇｌｅ　ｏｒａｌ　ｄｏｓｅ　ｏｆ　５０　ｍｇ　ｏｆ　Ｉ．Ⅱａｎｄ　１１１　ｗａｓ　ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ　ｔｏ　３　ｄｏｇｓ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｄｒｕｇ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｐｌａｓｍａ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＨＰＬＣ．Ｔｈｅ　ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｗｅｒｅ　ｆｉｔｔｅｄ　ａｎｄ　ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ　ｂｙ　３ｐ９７　ｐｒｏｇｒａｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｆａｓｔ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｌａｙｅｒ　ｏｆ　ｄｏｕｂｌｅ—ｌａｙｅｒ　ｔａｂｌｅｔｓ　ｃｏｕｌｄ　ｄｉｓｉｎｔｅｇｒａｔｅ　ｑｕｉｃｋｌｙ　ａｎｄ　ｒｅｌｅａｓｅ　３０％ｏｆ　ｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ　ｆｒｏｍ　Ｉ　ａｔ　０．５　ｈ　ｆｏｌｌｏｗｅｄ　ａ　ｓｌｏｗ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｕｎｔｉｌ　１２　ｈ．Ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｉｅｓ　ｏｆ　Ｉ　ａｎｄ　Ｉ１　ｗｅｒｅ　１０６．１４％ａｎｄ　１０２．９０％．　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ｎｏ　ｓｉｎｉｇｉｆｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｉｎ　ＭＲＴ，ｔｌ／２　ａｎｄ　Ｃ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｉ　ａｎｄ　ＩＩ．Ｔ　ｏｆ　１　ｗａｓ　ｄｉｓｔｉｎｃｔｌｙ　ｓｈｏｒｔｅｒ　ｔｈａｎ　ＩＩ　ａｎｄ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｗａｓ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｉ　ａｎｄ　１１Ｉ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｉ　ｈａｓ　ｆａｓｔ—ｒｅｌｅａｓｅ　ａｎｄ　ｓｕｓｔａｉｎｅｄ—ｒｅｌｅａｓｅ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｖｏ．Ｉ，ｌＩ　ａｎｄ　１１Ｉ　ａｒｅ　ｂｉｏｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ　ｉｎ　ｄｏｇｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　ｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ；ｄｏｕｂｌｅ—ｌａｙｅｒ　ｔａｂｌｅｔ；ｆａｓｔ—ｒｅｌｅａｓｅ；ｓｕｓｔａｉｎｅｄ—ｒｅｌｅａｓｅ；ＨＰＬＣ；ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ；ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ　双氯芬酸钾（ｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ，ＤＰ）由　ＮＶＡＲＴＩＳ公司开发，主要用于短期非风湿性疼痛的　诺华制药），甲醇（色谱纯天津四友），醋酸、无水醋　酸钠、正已烷、异丙醇均为分析纯，家犬（广州军区　武汉总医院动物中心）。　１．２仪器　治疗，如牙痛、手术和创伤性疼痛等，具有起效快、疗　效好、副作用小的特点，半衰期为１～２　ｈ，一般需一　天３～４次给药¨　。为了在发挥药物起效快特点的　同时，减少给药次数，延长药效，以满足各种疼痛患　者的需要，笔者研制了在缓释同时又能快速起效的　ＤＰ双层片。本文报道双层片的体外释药行为及其　在家犬体内的药动学特征，并与普通片进行比较。　ＵＶ一２６０型紫外分光光度计（日本岛津），ＲＣＺ一　５Ａ型智能药物溶出仪（天滓大学精密仪器厂），微　孔滤膜（上海医药工业研究院高东药用净化器材　厂），ＬＣ一１０ＡＴ　ＶＰ型泵，ＳＰＤ一１０Ａ　ＶＰ型紫外检测器　（日本岛滓）；Ｎ２０００色谱数据工作站（浙江大学智　１试验材料　１．１试药和动物　能信息工程研究所）。　２方法　２．１　ＤＰ片体外释放度试验　双氯芬酸钾原料药和对照品（湖北潜江制药　厂），非诺贝特酸（上海申隆药业有限公司），ＤＰ双　层片、速释片和缓释片（自制），普通片凯扶兰（北京　依照《中国药典》２０００版体外释放度试验方法　第一法转篮法测定，释放介质为９００　ｍＬ　ｐＨ　６．８磷　酸盐缓冲液，温度为（３７．５±０．５）ｏＣ，转速为１００　ｒ／　ｍｉｎ。于０．２５，０．５，１，２，３，４，６，８，１０，１２　ｈ取样５　ｍＬ　（速释片的取样时间为０．０５，０．０８３，０．１６，０．２，　作者简介：符旭东，女，３６岁，药剂学博士，主管药师。　研究方向：缓控释制剂。　１２６　维普资讯 http://www.cqvip.com

第２期符旭东，等．双氯芬酸钾双层片的体外释放度及其在家犬体内的药动学研究　０．２５，０．５　ｈ），同时补充等体积同温介质，用０．８　ｍ　微孑Ｌ滤膜过滤。取续滤液１　ｍＬ至５　ｍＬ量瓶中，加　释放介质定容，在２７６　ｎｍ处测定Ａ值，计算累积释　放度。　２．２　ＨＰＬＣ测定ＤＰ血药浓度　２．２．１色谱条件Ｓｐｈｅｒｉｓｏｒｂ　ＯＤＳ　ｌＩ柱（４．６　ｍｍ　ｘ　２５０　ｍｍ，５　Ｉｘｍ）；流动相：　［甲醇：醋酸钠缓冲液　（０．０２　ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ＝３．８）１＝６８：３２；流速：１．０　ｍＬ／　ａｒｉｎ检测波长：２８０　ｎｍ；进样量：２５　ＩｘＬ。　２．２．２血浆样品的处理根据文献［２，３］，确定以　下样品处理方法：取血浆０．５　ｍＬ，置１０　ｍＬ离心管　中，加入１　ｍＬ（２．５　ｍｏｌ／Ｌ）磷酸溶液，于漩涡振荡器　上混旋３０　Ｓ，加入０．５　ｍＬ内标非诺贝特酸溶液（质　量浓度约为１　ｍＬ）混匀，再加入正已烷一异丙醇　（９：１）５　ｍＬ，用漩涡振荡器提取５　ｒａｉｎ，离心３　０００　ｒ／　ａｒｉｎ　１０　ｒａｉｎ，小心吸取上清液，于４０　ｃｃ氮气吹干，残　渣用１００　ｔｘＬ流动相溶解后进样。　２．２．３血浆标准曲线的绘制　准确量取浓度约为　０．１、０．２５、０．５、１、２．５、５、１０　ｇ／ｍＬ的ＤＰ甲醇溶液　０．５　ｍＬ，分别置于１０　ｍＬ离心管中，４０　ｃｃ氮气吹干，　加入０．５　ｍＬ空白血浆，按“２．２．２血浆样品的提取”　项下方法操作，以质量浓度（Ｐ）对ＤＰ与内标的峰面　积比（Ｙ）进行线性回归。　２．３家犬体内的药动学研究　２．３．１给药与取样方法选择健康雄性家犬３只，　体重为１２～１５　ｋｇ，禁食１２　ｈ后，三周期交叉口服　ＤＰ双层片、缓释片和普通片各５０　ｍｇ（间隔为１　周），随服２０　ｍＬ水。分别于给药前１　ｈ及给药后　０．５、１、１．５、２、２．５、３、４、５、７、９、１２　ｈ采静脉血３　ｍＬ，　３０００　ｒ／ｍｉｎ离心１０　ｒａｉｎ，分离得到血浆。按上述“血　浆样品提取”项下方法提取后进样，计算即可得到　血药浓度。　２．３．２数据处理与统计分析采用３Ｐ９７药动学程　序，按非房室模型处理血浓一时间数据，求算药动学　参数。用药时曲线末端计算ｔ　＝０．６９３／ｋ，Ｔｍ　、　Ｃ　为实测值。ＡＵＣ采用梯形法计算，ＡＵＣ　＝　ＡＵＣｏ￣　＋Ｃ　／ｋ，ｔ　为最后的取样时间点，Ｃ　为最后　取样点的血药浓度，ｋ为？肖除速度常数。将上述参　数进行对数转换后，进行方差分析和双单侧ｔ检验。　３　结果　３．１　３种ＤＰ片剂的体外释药特征　ＤＰ速释层、缓释层和双层片的体外释放曲线见　图１。　世　鞋　图１　ＤＰ速释层、缓释层和双层片的体外累积释放曲线（ｎ＝６）　Ｆｉｇ．１　Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｐｒｏｆｉｌｅ　ｏｆ　ｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｆａｓｔ－　ｒｅｌｅａｓｅ　ｌａｙｅｒ，ｓｕｓｔａｉｎｅｄ－ｒｅｌｅａｓｅ　ｌａｙｅｒ　ａｎｄ　ｄｏｕｂｌｅ－ｌａｙｅｒ　ａｔｂｌｅｔｓ（ｎ＝６）　３．２　ＨＰＬＣ测定ＤＰ血药浓度　将空白血浆、空白血浆外加药物对照品以及用　药后的血浆样本提取后进样，结果显示内源性物质　和代谢产物不干扰药物的测定。以药物与内标的峰　面积比Ｙ对药物的质量浓度Ｐ（　ｇ／ｍＬ）用加权１／ｘ！　最小二乘法进行回归，典型的回归方程为　Ｙ＝０．０２０４２ｐ＋０．０００４．ｒ＝０．９９８７　本法的线性范围为０．１～１０　ｇ／ｍＬ，最低定量浓度　为０．１　ｇ／ｍＬ。０．２４８、０．９９２、４．９６０　ｍＬ　３种浓　度血浆样品的回收率分别为１０２　９８％、９８　９９％、　１００．４３％，Ｅｔ内标准差为４．８６％、４．６３％、７．６７％（ｎ　＝５），日间标准差为５．３７％、４．２０％、６．２０％（ｎ＝　５）。　３．３家犬口服ＤＰ片后的药动学参数　家犬单剂量口服５０　ｍｇ　ＤＰ片后的血药浓度一时　间曲线见图２，主要的药动学参数见表１。　￡／ｈ　图２　家犬单剂量口服ＤＰ双层片、缓释片和普通片后的血　药浓度・时间曲线　Ｆｉｇ．２　Ｄｒｕｇ　ｐｌｓａｍａ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｖｅｒｓｕｓ　ｔｉｍｅ　ｃｕｒｖｅｓ　ａｆｔｅｒ　ｓｉｎｇｌｅ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ　５０　ｍｇ　ｏｆ　ｏｒｄｉｎａｒｙ／ｓｕｓｔａｉｎｅｄ－　ｒｅｌｅａｓｅ／ｄｏｕｂｌｅ－ｌａｙｅｒ　ｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｔａｂｌｅｔｓ　药动学参数对数转换后的方差分析和双单侧ｔ　检验结果表明３种制剂的ＡＵＣ差异无显著性，缓释　片和双层片相对于普通片的生物利用度分别为　１０６．１４％和１０２．９０％，９０％置信区间评价结果显示　３种制剂的吸收程度等效。缓释片双层片的ＭＲＴ　和ｔ１／２较普通片显著延长，　（下转第１３４页）　１２７　维普资讯 http://www.cqvip.com

广东药学院学报（ＡＣＡＤ　Ｊ　ＧＣＰ）２００５，２１（２）　且过１００目筛３次，使其混合均匀。适　具有很强的吸水膨胀性，有优良的崩解性能。它们　等量递加法，２～５８．８　Ｎ，因为硬度过低，药片　都具有纤维结构，孔隙率和溶胀性是这类崩解剂最　宜的硬度范围是３９．重要的崩解机理，即使在含量很低时，也可以发生毛　在运输过程中容易碎裂，硬度过高，会影响其溶出　细管作用，促使片剂崩解　ｊ。本文结果表明，３种崩　解剂的含量及比例不同，对本品的溶出度、硬度、外　度。在压片时应调节适当的压力，使药片的硬度达　到要求的范围。　５　口腔速溶片在口腔中遇到唾液而迅速崩解，人　观等的影响也不同。当崩解剂质量分数为６％，Ｃ—　４．６，婴儿唾液的ｐＨ值为　ＣＭＣ—Ｎａ与ＰＶＰＰ质量比为１：１时，硬度、溶出度、外　正常唾液的ｐＨ值为５．６～７．３５～６．８５，接近中性，唾液的成分中有９９％是水，　观都达到最佳。当含量过高时，片剂内部毛细管过　６．粗，水分的快速渗透使其中的空气不能及时逸出，阻　因此在测对乙酰氨基酚口腔速溶片的溶出度时，以　止水分进入，使崩解延缓　。　５００　ｍＬ蒸馏水为介质，转速为５０　ｒ／ｍｉｎ。　４．２　口腔速溶片的制备工艺有冷冻干燥工艺、直接　广东药学院龙晓英教授、广州市医药工业研究　　压片工艺、闪流技术、固态溶液技术和喷雾干燥工　所梁超峰同志对本文给予具体指导，特致谢忱！艺。在以上５种制备工艺中，直接压片工艺具有成　本低，制备简单，所制得的片剂在口腔内能迅速溶解　并且口感较好的优点　，因此，选用直接压片工艺制　备对乙酰氨基酚口腔速溶片。　４．３因为口腔速溶片在口内释放，崩解剂为不溶性　物质，崩解后有沙砾感，所以需加入适当的辅料改善　口感。甘露醇为白色结晶性粉末，无臭且清凉味甜，　口感较好，水中易溶且稳定，流动性好，因此选用甘　露醇做填充剂　。　４．４由于所制备的对乙酰氨基酚口腔速溶片是小　参考文献　［１］徐小薇．对乙酰氨基酚及复方制剂［Ｊ］．中国药房，２００１，　１２（２）：１２３．　［２］金一，大熊英树，汪成发，等．尼可地尔Ｉ２＇腔速溶片的研究　［Ｊ］．药学学报，２００１，３６（７）：５３５．　［３］高春生，崔光华．速释固体制剂的研究发展［Ｊ］．国外医学　药学分册，１９９８，２５（５）：２９３．　［４］刘梅，崔光华．Ｉ２＇腔速溶片的研究进展［Ｊ］．国外医学药学　分册，２０００，２７（６）：３４７．　【５］贺建昌，张建春，蒋雪涛．新型口服固体速释制荆——口　腔速崩片［Ｊ］．药学实践杂志，２０００，１８（３）：１５１．　（２００５—０１—１０收稿；２００５—０３—２８修回）　儿剂量，主药的含量较低，将主药与辅料混合时要用　（上接第１２７页）　ｃ　显著降低，说明缓释片和双层片有明显的缓释效　入速释层可使药物的达峰时间提前，有利于快速地　果。缓释片的　片和普通片的　明显高于普通片和双层片，双层　差异无显著性，说明双层片中加　表１　家犬单剂量口服ＤＰ普通片、缓释片和双层片后的药动学参数（ｎ＝３）　Ｔａｂ．１　Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｉｎ　ｄｏｇｓ　ａｆｔｅｒ　ｏｒａｌ　ｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｔａｂｌｅｔｓ　发挥镇痛作用。　４讨论　￡。小ＭＲＴ与缓释片差异无显著性，证明双层片在体　内发挥缓释作用的同时能够保持快速起效的特点，　值得进一步研究和开发。　参考文献　从体外释放曲线可以看出速释层在５　ｍｉｎ时溶　出即可达到９０％，缓释层在０．５　ｈ的累积释放度约　为１０％，体外可缓慢释药１２　ｈ。双层片中的速释部　分能够快速崩解，在０．５　ｈ的释放可以达到３０％，随　后缓释层缓慢释药至１２　ｈ左右。　［１］符旭东，付晓琴，李海萍．双氯芬酸钾的临床应用及制剂　研究进展ｌ　Ｊ］．中华临床医药杂志，２００２（８）：１２２．　［２］李克，赵飞浪，袁倚盛，等．双氯灭痛在正常人体内的药　物动力学研究［Ｊ］．中国医院药学杂志，１９９５，１５（１）：５．　家犬体内药动学的研究表明双层片的　与普　通片差异无显著性，ｃ　较普通片低，ｔ　、ＭＲＴ明显　［３］卓海通，卡德尔江，凌树森，等．口服双氯芬酸钾胶囊剂　药动学及其生物利用度研究［Ｊ］．中国临床药理学杂志，　１９９８，１４（１）：４４．　（２００５—０１—２０收稿；２００５—０４—０１修回）　大于普通片。双层片的　１　３４　明显低于缓释片，ｃ一、