委托书编号: 委托单位: 检测项目:大肠埃希氏菌 检测依据:GB/T 5750.12-2006 4.1多管发酵法 样品名称: 样品数量: 样品编号: 样品状态: 收样日期: 检测日期: 环境温度: 环境湿度: 操作方法: 一、乳糖发酵实验 1、取10ml水样接种到10ml双料乳糖蛋白胨培养液中,取1ml水样接种到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中,另取1ml水样注入到9ml灭菌生理盐水中,混匀后吸取1ml(即0.1ml水样)注入到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中,每一稀释度接种5管。对已处理过的出厂自来水,需经常检验或每天检验一次的,可直接种5份10ml水样双料培养基,每份接种10ml水样。 2、检验水源水时,如污染较严重,应加大稀释度,可接种1,0.1,0.01ml甚至0.1,0.01,0.001ml,每个稀释度接种5管,每个水样共15管。接种1ml以下水样时必须作10倍递增稀释后,取lml接种,每递增稀释一次,换用1支lml灭菌刻度吸管。 3、将接种管置36±l°C培养箱内,培养24h±2h,如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸,则可报告为总大肠菌群阴性,如有产酸产气者,则按下列步骤进行。 1 / 4下载文档可编辑
二、分离培养验证: 经培养24h后,将产酸产气的发酵管,接种于EC-MUG培养基,置于44.5°C±0.5°C水浴箱培养24h ±2h,将培养后的EC-MUG管在暗处用紫外光灯照射,如有蓝色荧光产生,则表示水样中含有大肠埃希氏菌。 培养基 二倍浓缩乳糖蛋白胨培培养温度 36±1°C 培养时间 24h±2h 24h±2h 24h±2h 养液 乳糖蛋白胨培养液 EC-MUG培养基 观察结果 序号 1 2 3 4 5 6 样品 编号 36±1°C 44.5±0.5°C 乳糖发酵 10ml EC-MUG 0.1ml 结果报告 0.1ml (MPN/100mL) 1ml 10ml 1ml 2 / 4下载文档可编辑
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操 作 人: 复 核 人:
(学习的目的是增长知识,提高能力,相信一分耕耘一分收获,努力就一定可以获得应有的回报)
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