抗纤一号治疗乙肝肝纤维化效果的初步研究

涂海斌; 林健玲; 林恢; 张菊珍 【期刊名称】《《当代医学》》 【年(卷),期】2020(026)001 【总页数】4页(P29-32)

【关键词】乙肝; 肝纤维化; 中药; 抗纤一号; 疗效 【作 者】涂海斌; 林健玲; 林恢; 张菊珍

【作者单位】福建医科大学孟超肝胆医院超声科 福建 福州 350000 【正文语种】中 文

全球受乙肝威胁的人数众多，据一项最新的调查显示，截止2016年底，全球约有乙肝患者2.92亿[1]。其中绝大多数因为发现较晚或未引起足够重视而逐渐发展为肝硬化，部分甚至发展为肝癌。肝硬化及肝癌不仅会增加治疗费用[2]，而且会加重患者及家属的心理负担，并且由于现代医学技术的局限性，治疗效果尚未达到令人满意的效果[3]。乙肝肝硬化通常经由肝纤维化逐步恶化而成，病理分期可将肝纤维化分为5个阶段，即S0～S4，S0未见明显肝纤维化征象，S4为早期肝硬化，S1～S3为肝纤维化阶段[4]。以往有研究指出，处于肝纤维化阶段时，肝脏尚能分解吸收过量的纤维组织，进而延缓甚至逆转肝硬化进程。若能有效延缓或逆转肝纤维化进程，使乙肝患者不进入肝硬化阶段，不仅可以节省大量社会及医疗资源，而且还可有效提升乙肝患者的治疗效果。以往曾有学者使用中药治疗乙肝肝纤维化的

研究，并且取得了一定的效果[5]。但以往研究多以汤剂作为主要研究对象，不便患者使用。医嘱服从性降低，影响治疗效果。因此，为患者提供方便服用的中药制剂，显得尤为重要。本院自主研发的“抗纤一号”胶囊，以黄芪、丹参、川芎、赤芍、白芍等为主要成分，具有益气养阴，柔肝化瘀的作用。在临床已使用多年，可有效延缓肝硬化患者病程。但能否逆转肝纤维化还未研究，若“抗纤一号”具有缓解或逆转纤维化的作用，则可将其运用于肝纤维化患者的治疗中，防止病程进展，对改善肝纤维化患者预后具有重要意义。

以往常以穿刺活检作为筛选标准，病理作为肝纤维化诊断的金标准，其诊断价值不可动摇，但其费用高昂，采集标本范围有限（约为肝脏体积的1/50 000），并存在一定的操作风险。本研究需多次动态观察用药效果，多次进行肝穿并不实际，使部分患者放弃参加研究，限制其进一步运用。为此，本课题引用无创声辐射力脉冲成像（ARFI）作为肝纤维化的辅助诊断指标，ARFI的诊断价值已得到认可[6]，ARFI可测定声辐射在肝脏内的传播速度，该传播速度与肝脏硬度成正相关，因此，通过声速的测量间接反应肝脏硬度，其与肝纤维化病理标准存在高度相关性，故可作为筛选及用药效果评估的工具。筛选出符合要求的患者，研究服用胶囊12个月后，声传播速度较服药前是否发生变化，以证实该胶囊是否具有延缓及逆转肝纤维化的功能。 1 资料与方法

1.1 临床资料 研究前，为验证本院超声仪器所测量的ARFI测值与肝纤维化之间的相关性，首先收集符合以下招募标准的肝脏穿刺活检患者进行研究前验证，共收集64例患者的病理资料及ARFI测值。纳入标准：①已确诊为乙肝病毒感染者；②配合接受ARFI检测，并且ARFI测值为1.20～1.90 m/s；③对研究情况知晓并同意接受研究。排除标准：①乙肝合并其他肝炎病毒感染的患者；②无法配合或病情特殊而不适宜ARFI检测的患者（经反复练习仍然无法配合呼吸，大量腹水，肥胖、

肋间隙过窄、合并肝恶性肿瘤等）；③非乙肝病毒感染引起肝纤维化患者，如自身免疫性肝炎，药物性肝炎，酒精性肝炎等。将符合要求的患者纳入本研究，使用抛硬币法随机将患者分为研究组与对照组。收集两组患者临床资料，见表1。对照组患者根据实际情况服用抗病毒药及肝脏保护药物，研究组患者在此基础上使用抗纤一号治疗（本品为棕褐色素片，口服，每次3～5片，每天3次）。

表1 两组患者一般情况比较Table 1 Clinic base data of two group组别第一次测值HA1 LN1 IV-C1 PCIII1年龄（岁）患病时间（月）男/女抗病毒（是/否）对照组（n=30）1.55±0.19 224.82±97.17 175.20±44.39 207.00±44.76 12.97±1.99 40.40±11.64 145.70±83.60 17/13 12/18研究组（n=34）1.51±0.20 239.41±100.94 178.17±52.45 197.00±59.12 13.39±2.37

42.62±14.05 184.09±104.44 20/14 17/17 t P 0.791 0.587 0.243 0.265 0.761 0.682 1.609 0.030 0.643 0.432 0.559 0.809 0.792 0.450 0.498 0.113 0.860 0.423 1.2 方法

1.2.1 ARFI测值与肝纤维化等级验证 病理诊断标准采用中华医学会2000年修订的《病毒性肝炎防治方案》，共分为5期：S0期，无纤维化；S1期，纤维化扩大至汇管区，但仅存在于肝窦周围或正常肝小叶内；S2期，纤维化已扩散至汇管区周围，并且有纤维间隔形成，但正常肝小叶结构仍存在；S3期，大量的纤维间隔已经形成，小叶结构较紊乱，但未发生肝硬化；S4期，假小叶已经形成，为早期肝硬化阶段。在进行肝脏活检穿刺之前，测量感兴趣区的ARFI测值，并做相关性验证。

1.2.2 使用仪器与测量方法 本研究使用西门子ACUSON S 3000彩色超声诊断仪，使用6C1凸阵探头，探头频率选用3～5 MHz，嘱患者平卧，上抬右肢，选取可清晰显示肝右叶并且无明显血管、胆管穿行的切面作为感兴趣区（Range of

interest，ROI），ROI距离肝包膜表面约为3 cm，嘱患者屏气，选定ROI，并测量ARFI测值。每次测值前均需屏气，共重复测量5次相邻区域，最终取平均值[7]。研究对象分别在入组前，入组后1、3、6、9、12个月进行ARFI测值。测量均由同一个高年资医师完成。本研究于清晨空腹采取患者血液标本，并测定肝纤维化四项指标。

1.3 统计学方法 采用SPSS 23.0软件进行统计学分析，研究前肝纤维化与ARFI相关性验证采用Spearman等级相关分析。计量资料采用“”表示，若符合正态分布采用t检验，不符合正态分布采用两独立样本的秩和检验。重复测量比较采用重复测量的方差分析法，如不符合球形假设检验，采用Greenhouse-Geisser法进行校正。以P＜0.05为差异具有统计学意义。 2 结果

2.1 ARFI测值与肝纤维化分期相关性 两者相关性为0.789，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 相关性验证Table 2 Correlation verification病理分期0.789＜0.001 75方法arfi测值 皮尔逊相关性显著性（双尾）个案数arfi测值1 75

2.2 两组患者入组前后ARFI测值比较 研究组患者在服药12个月后，ARFI测值低于入组前测值，对照组则较入组前有所升高，且差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。研究组患者ARFI测值于入组后6个月起低于对照组，并且随着用药时间延长，两者差距逐渐扩大。并且通过主体内效应检验可知，治疗方法与治疗时间存在交互作用，见表4。随着治疗时间的延长，研究组肝脏硬度值逐步下降，对照组则逐渐上升，见图1。

2.3 两组患者治疗后肝纤维化四项指标比较 研究组在服药12个月后，各项指标均低于对照组，且差异具有统计学意义（P＜0.05），见表5。

表3 两组患者治疗前后ARFI测值比较（m/s）Table3 ARFI valueof twogroup

pre-treatmentandpost-treament(m/s)P t组别对照组研究组0.001＜0.001入组时1.551±0.192 1.511±0.199入组后12个月1.594±0.188 1.417±0.239 3.798 6.621

表4 两组患者入组后各次ARFI测值比较（m/s）Table 4 ARFI value of two group in different time(m/s)时间第2次（1个月）第3次（3个月）第4次（6个月）第5次（9个月）第6次（12个月）对照组1.560±0.186 1.570±0.189 1.577±0.195 1.591±0.188 1.594±0.188研究组1.496±0.203 1.474±0.208 1.451±0.215 1.432±0.222 1.417±0.240 t P 1.311 1.931 2.446 3.059 3.263 0.195 0.058 0.017 0.003 0.002

图1 两组患者各次测值情况Figure 1 ARFI value of two group in different time

表5 两组患者入组12个月后肝纤维化四项指标比较（ng/mL）Table 5 Liver fibrosis marker of two group in 12 months(ng/mL)t P＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001指标HA LN IV-C PCⅢ对照组201.69±64.68 161.65±44.56 173.33±52.72 12.24±2.14研究组109.75±62.36 90.03±40.09 101.59±35.22 7.86±2.02 5.784 6.769 6.469 8.413 3 讨论

乙肝患者起病隐匿，加之肝脏实质并无痛觉神经，因此，早期感染患者并无特殊症状，而未能引起患者重视，多数患者常因疼痛难以忍受而入院检查，此时肝功能多已明显异常，部分患者直至发生严重症状（肝硬化导致的大量腹水，晚期肝癌等）才入院检查，此时进行治疗，不仅花费巨大，而且治疗效果并不十分理想。近来随着国民健康意识的提升及健康体检的普及，许多患者可以早期发现乙肝病毒感染，并积极寻求正规合理治疗。乙肝常规治疗多以抗病毒及保护肝功能为主要方向。抗病毒治疗不仅可以明显降低新生肝癌发生率，而且还可降低肝癌术后复发率，对延

缓肝硬化患者的生存期起到重要作用[8-10]。

肝硬化的形成从病理层面分为5个阶段，即S0～S4，S4阶段即早期肝硬化，肝硬化患者主要是由于肝星状细胞激活，产生大量纤维组织，导致正常肝窦组织缺失，假小叶形成，逐渐累积于假小叶内，无法吸收，而加重肝硬化程度，形成恶性循环[11]。S1、S2、S3常被认为属于肝纤维化期，肝纤维化期肝脏内存在较大量的正常肝窦组织，肝血管结构未完全破坏，残余的血管仍有能力吸收大量的纤维结缔组织，部分或完全恢复肝脏正常结构仍有可能[12]。已有大量基础研究证实肝星状细胞可发生逆转，由激活状态变为静止状态[13]。若能在未形成肝硬化时便积极治疗，不仅可以有效提升治疗效果，还可减轻社会及家庭治疗费用。

有研究显示，中药（护肝解纤汤，鳖甲软肝片，舒肝颗粒等）在治疗肝纤维化时可起到较好的效果[14-15]。中药品种繁多，药理作用各不相同，由本院自主研发的抗纤一号，以黄芪、丹参、川芎、赤芍、白芍等作为主要成分，临床已使用多年，对延缓肝硬化病情疗效尚可，但能否延缓或逆转肝纤维化进程未做透彻研究。受此启发，本研究以肝纤维化患者为研究对象，以反复肝脏穿刺活检作为主要手段，肝脏穿刺活检作为肝脏病理诊断的金标准，具有重要临床意义。但肝脏穿刺属于有创操作，增加诊断风险，肝脏穿刺后必须严格卧床6 h，此外肝脏穿刺活检抽取组织有限，并不能代表肝脏整体情况，且肝脏穿刺活检费用昂贵，多次反复穿刺并不符合现实情况。因此，本研究评估肝脏硬度采用的是超声最新弹性技术-ARFI，ARFI属于无创操作，在进行普通超声检查时即可同步完成，无需额外支付费用，可多次重复测量。ARFI可测定声辐射在肝脏内传播速度，该传播速度与肝脏硬度成正相关[16]，为验证本院所采用的这一技术具有较高的可信度，在进行本研究之前，收集了部分进行过肝脏穿刺的患者进行验证。结果表明，本院所采用的这一技术，具有较高程度的相关性，这为本研究的继续推进奠定了基础。本研究在入组后共进行了5次ARFI测量，为避免不同操作者操作习惯引起的误差，所有ARFI测量均由

同一医师完成，保证了较高的一致性。结果表明在服药12个月后，研究组ARFI测值较用药前明显减低，说明抗纤一号对于部分患者可起到延缓甚至逆转肝纤维化的作用。

本研究在采用最新超声技术的同时，收集了肝纤维化四项指标进行验证，在服药12个月后，四项指标均较服药前有明显减低，与部分学者以往研究结果类似[17]。复方鳖甲软肝片在我国使用范围较广，主要通过抑制Ⅰ型前胶原mRNA的表达而减少胶原蛋白的合成，并且可抑制储脂细胞的合成，降低胶原蛋白总量[18]。护肝解纤汤主要由姜黄素与柴胡等中成药制成，具有抑制星状细胞增殖，诱导星状细胞凋亡的作用[15]。抗纤一号包含多味中药，丹参可减少肝内胶原，层粘联素，纤维粘联蛋白的含量，并且可明显抑制Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原量的异常增加，还可相应的降低转化生长因子p（TGFP）RNA的含量，抑制星状细胞转化为成纤维细胞和异常增殖[19]，是活血化瘀之药，可起到抗炎保护肝细胞的作用。研究指出，丹参多酚酸盐能够抑制肝组织中的TGF-β1、Smad2/3、Smad7、p-P13K、p-AKT、p-mTOR等蛋白的表达，可以显著改善肝功能及肝纤维化指标。与此同时，丹参多酚酸盐能够抑制肝组织中TGFβ1/Smad和P13K/AKT/mTOR信号通路，且能够通过调节细胞外基质的合成和降解来抑制肝纤维化进展[20]。从中医学角度看，肝藏血，主疏泄，容易气血失调，血瘀则容易导致肝纤维化加重，黄芪具有补气升阳，益卫固表的作用，对肝细胞的免疫损伤具有防护作用，还可促进肝细胞再生，延缓甚至逆转肝纤维化进程[21]；还可减少Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原纤维在肝内的沉积，并且随着疗程延长，作用更加显著[22]。黄芪的分解产物发酵黄芪多糖可以显著降低肝纤维化小鼠内的HA、LN、Ⅳ-C、PCⅢ的水平，抑制细胞生物学过程中多个信号通路以降低肝纤维化的形成[23]。川穹是我国传统中药，该药可显著降低老龄大鼠脑、心、肝中过氧化脂质含量，并能提高脑、肝中单胺氧化酶和超氧化物歧化酶活力，能够一定程度的清除自由基，保护肝脏细胞[24]。抗纤一号中的其他几味中药

也同样具有活血祛瘀的功效。

本研究所选患者例数有限，存在一些不足。①入组时未将是否服用抗病毒药患者单独分开，而是一并纳入研究，抗病毒药对延缓肝纤维化的作用有可能加大抗纤一号的作用。在后续的研究中若条件允许应将此类患者分类后纳入研究。②两组患者平均年龄虽然差异无统计学意义，但组内患者年龄差距较大，未能对不同年龄的患者分层比较，并且患病时间均以患者首次获知乙肝感染至入组时时间进行计算，并不能代表真实患病时间。③以ARFI测值作为评估治疗效果的依据，由于技术原因，即便同一操作者，同一患者，在同一时间多次检测，其测值均有一定范围的误差，并且该测值并不能完全代表肝脏纤维化程度，因此，新的准确性更高的无创测量技术急需研发。在今后的工作中，很有必要增大研究数量，采用更加精确的测量技术，进行更细致的亚组分析，对抗纤一号的临床效果与机理作进行更加透彻的研究。 综上所述，本研究的确存在一些不足，但抗纤一号对于延缓或逆转乙肝肝纤维化切实可起到一定作用，值得在临床中进一步推广。 参考文献

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