一、填空题
1、球菌的大小以______表示，杆菌的大小以______表示。 2、腺病毒是通过五邻体上的______行使吸附功能的。
3、 生物固氮必须满足六个条件，即______、______、______、______、______和______。 4、根据______，微生物可分为光能营养型和化能营养型。
5、在真核微生物细胞质内存在着沉降系数为______S的核糖体，它是由______S和______S两个小亚基组成，而其线粒体和叶绿体内则存在着______S核糖体，它是由______S和______S两个小亚基组成。
6、微生物在现代生物分类系统中分别属于______界、______界、______界和______界。 7、影响微生物生长的主要因素有______、______、______、______和______等。 8、清水中营养物浓度很低，所以清水中的微生物具有许多共同特征来适应环境，比如______、______和______等。
9、典型质粒的核酸分子是______，存在于质粒上的特定基因，使微生物获得了若干特殊功能，如______、______、______、______、______ 或______等。
10、在免疫学反应中，抗原抗体反应的一般规律是______、______、______、______、______。
二、判断题
11、在整个生物界中，只有古生菌的细胞膜上才能找到单分子层细胞膜。（ ） 12、在促进扩散过程中，载体蛋白对被运输物质具有较高的专一性，一种载体蛋白只能运输一种物质。（ ）
13、葡萄糖的生物氧化从本质上来看是与化学氧化（即燃烧）相同的。（ ）
14、病毒几乎可以感染所有的细胞生物，但就某一种病毒而言，它仅能感染一定种类的微生物、植物或动物。（ ）
15、分生孢子是真菌中最常见的无性孢子，各类真菌都产生这种类型的孢子。（ ） 16、根据16S和18S rRNA测序和统计结果所提出的三域学说来看，真核生物域与古生菌域更为接近。（ ）
17、微生物生长的最适pH与合成某种代谢产物的pH是一致的。（ ） 18、在极端环境中生存的微生物也可以在普通条件下生存。（ ） 19、遗传型相同的个体在不同环境条件下会有不同的表现型。（ ）
20、干扰素是高等动物细胞在病毒或干扰素诱生剂刺激下所产生的具有广谱抗病毒功能的纯蛋白。（ ）
三、选择题
21、支原体的细胞特点是（ ）。 A.去除细胞壁后的细菌 B.有细胞壁的原核微生物 C.无细胞壁的原核微生物 D.呈分枝丝状体的原核微生物
22、自然界中的大多数微生物是靠（ ）产能。 A．发酵 B．光合磷酸化 C．呼吸
D．底物水平磷酸化
23、下列繁殖方式中哪种不属于真核细胞型微生物的繁殖方式？（ ）
A．复制 B．芽生 C．孢子生殖 D．二分裂
24、NPV是（ ）。 A．核型多角体病毒 B．质型多角体病毒 C．颗粒体病毒 D．非包涵体病毒
25、E.coli的营养类型属于（ ）。 A．光能自养 B．光能异养 C．化能自养 D．化能异养
26、 在下列四种菌种保藏法中，以（ ）的效果为最好。 A．石蜡油封藏法 B．砂土保藏法 C．冷冻干燥保藏法 D．液氮保藏法
27、在“后抗生素时代”，学者们关注的发展微生物生化药物的一个新方向是（ ）。
A．半合成抗生素 B．抗病毒抗生素 C．生物药物素 D．益生菌制剂
28、菌种的分离、培养、接种、染色等研究微生物的技术的发明者是（A．巴斯德 B．科赫 C．列文虎克
D．别依林克（M. Beijernck）
29、下列哪一条是决定能否感染的最重要条件（ ）。 A．侵入数量 B．侵入门径 C．致病力 D．侵袭力
30、 丛枝状菌根是植物的一种（ ）。 A．内生菌根 B．外生菌根 C．内共生生物 D．外共生生物
四、名词解释
）。 31、孢子丝
32、类病毒（viroid）
33、最初能源
34、生长谱法
35、免疫球蛋白（Ig）
五、简答题
36、简述青霉属真菌的无性结构特征及其作用。
37、简述配制培养基的原则和步骤。
38、试列表比较由EMP途径中的丙酮酸出发的六条发酵途径、产物和代表菌。
39、为什么说人类自从18世纪后半叶开展产业革命以来，积累了大量的“生态债”？如何偿还“生态债”？
40、简述梯度平板法筛选抗性突变株的原理，设计一系列实验以筛选抗异烟肼的吡多醇的高产突变株。
六、论述题
41、实验设计：现有一培养基配方如下：可溶性淀粉30克，玉米粉25克，磷酸二氢钾4克，硫酸镁2.0克，琼脂20克，水1000毫升，pH 5.0。 问：
（1）适用于培养什么样营养类型的微生物（理由）； （2）各组分的作用及其营养功能；
（3）今配制250毫升此配方的试管斜面培养基，请写出具体的实验步骤。
参考答案
一、填空题
1、【答案】直径；宽（直径）×长 2、【答案】刺突
3、【答案】ATP供应；[H]及其载体；固氮酶；底物N2；Mg2＋；厌氧环境 4、【答案】能源不同
5、【答案】80；60；40；70；50；30 6、【答案】原核生物；真菌；原生生物；病毒 7、【答案】营养物质；水活性；温度；pH值；氧气
8、【答案】能在低营养浓度条件下生活；可运动；某些淡水中细菌具有异常形态 9、【答案】cccDNA；接合；产毒；抗药；固氮；产特殊酶；降解毒物 10、【答案】特异性；可逆性；定比性；阶段性；条件性
二、判断题
11、【答案】对 12、【答案】错 13、【答案】对 14、【答案】对 15、【答案】错 16、【答案】对 17、【答案】错
18、【答案】错 19、【答案】对 20、【答案】错
三、选择题
21、【答案】C 22、【答案】C 23、【答案】A 24、【答案】A 25、【答案】D 26、【答案】D 27、【答案】C 28、【答案】B 29、【答案】C 30、【答案】A
四、名词解释
31、答：孢子丝是指由气生菌丝成熟分化形成，可通过横割分裂方式，产生成串分生孢子的菌丝。孢子丝的形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状和轮生等多种，其中螺旋状的孢子丝比较常见。
32、答：类病毒，又称感染性RNA、病原RNA、壳病毒，是一种和病毒相似的感染性颗粒。类病毒是目前已知的最小可传染致病因子，只在植物体中发现，其所含核酸为裸露的环状ssDNA，相对分子质量很小。类病毒能耐受紫外线和作用于蛋白质的各种理化因素，如蛋白酶，胰蛋白酶，尿素等都不敏感，不被蛋白酶或脱氧核糖核酸酶破坏，但对RNA酶极为敏感。
33、答：最初能源是指外界环境提供给微生物的有机物、日光辐射能或若干还原态无机物，该类能源不能直接用作微生物各种生命活动的能源，只有经过微生物的能量代谢酶系的催化，使之转化成ATP等通用能源形式后，才能被真正利用。
34、答：生长谱法是指鉴别微生物营养需求的一种简便方法。在混有营养缺陷型细胞悬液的基本培养基平板表面，点加少量不同的待测营养物，经培养后，视某营养物周围是否出现生长圈，可鉴定该菌是何种营养缺陷型。
35、答：免疫球蛋白是指一类具有抗体活性以及与抗体有关的各种球蛋白，是抗体的同义词。纯化后的Ig分五类，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。
五、简答题
36、答：（1）青霉属真菌的无性结构特征
①分生孢子梗从菌丝细胞长出，有隔有分枝，小梗有单轮或双轮生，双轮生中又分为对称和不对称；
②分生孢子梗的分枝和轮生组成了复杂的扫帚状分枝结构；
③在扫状枝上，最后一级分枝为产生串生链状分生孢子的小梗，呈瓶梗状，着生小梗的细胞叫梗基，支持梗基的细胞叫副枝；
④分生孢子常为球形，椭圆形，呈蓝绿色。（2）青霉属真菌的无性结构作用 ①可产生青霉素、灰黄霉素等抗生素，还产生柠檬酸、延胡索酸、草酸等有机酸； ②危害水果，引起粮食、食品、饲料、皮革、纺织品等的霉坏变质； ③有的种是人、畜的病原菌，在实验室和研究微生物中是一类污染菌。 37、答：（1）配制培养基的原则
①目的明确；②营养协调；③理化适宜；④经济节约。 （2）配制培养基的步骤
原料称量、溶解（加琼脂）→（过滤）→定容→调pH值→分装→加棉塞、包扎→灭菌→（摆斜面）→无菌检查。
38、答：由EMP途径中的丙酮酸出发的六条发酵途径、产物和代表菌比较如表2-5-1所示。
EMP途径中的丙酮酸出发的六条发酵途径、产物和代表菌比较
39、答：（1）人类积累了大量的“生态债”的原因从18世纪后半叶开展产业革命起，人类开始从农耕经济时代迅速进入工商经济时代，在客观上开创了一个大规模掠夺地球资源和破坏大自然环境的时代，这也导致人类出现粮食危机、能源危机、资源耗竭、生态恶化和人口剧增五大危机。
（2）偿还积累的“生态债”的途径
修复已遭破坏的地球，保持人类与大自然的和谐相处以及经济和社会走可持续发展道路。 40、答：（1）梯度平板法是利用培养皿的一侧至另一侧铺有药物浓度呈梯度分布的琼脂培养基，以筛选相应抗药性突变株的方法。一般先将培养皿一侧搁高约5mm，倒入约10ml融化的琼脂培养基，待凝固后放回水平位置，再倒上等体积含适当浓度药物的相同培养基，放置一天后，即成梯度平板。培养基内的药物浓度呈线性梯度，一端浓度高，另一端浓度低。若在梯度平板上涂布经过诱变的菌悬液，经培养后，某些突变的菌株就可以在适当药物浓度的培养基表面生长，然后选择在较高药物浓度下生长的菌株，分离培养即可得到抗药性突变株。
（2）筛选抗异烟肼的吡多醇高产突变株主要是运用突变育种的方法，先得到大量的突变株，再从其中选择符合要求的菌株，的步骤如下：
①选择出发菌株：选用经历过生产条件考验的菌株作为出发菌株，这类菌株对生产环境有较好的适应性，正突变的可能性也比较大。 ②同步培养：进行诱变育种时，细菌尽可能达到同步生长状态，且处于对数生长期的细胞比较容易变异。 ③制备单细胞悬液：将细菌悬液先用玻璃珠振荡分散，再用脱脂棉或滤
纸过滤，保证细菌悬液可以均匀地接触到诱变剂。细菌的浓度大约为108个/ml。 ④诱变处理：诱变剂可选用物理诱变剂（紫外线、X射线、γ射线超声波等）或化学诱变剂（碱基类似物、烷化物、羟胺等）。
⑤中间培养：诱变处理后的细菌可能会有表型延迟的现象，可将诱变处理后的细菌在液体培养基中培养几小时，待细菌分裂几代，显现出稳定的变异。
⑥抗异烟肼的吡多醇的高产突变株的筛选：先将培养皿一侧搁高约5mm，倒入约10ml融化的琼脂培养基，待凝固后放回水平位置，再倒上等体积含适当浓度异烟肼的相同培养基，放置一天后，即成异烟肼梯度平板。将细菌悬液涂板后放置培养一段时间，在异烟肼浓度高的区域能够生长的菌株即为抗异烟肼的突变株。
六、论述题
41、答：（1）该培养基适合培养化能异养型微生物，理由如下：
培养基中的可溶性淀粉为有机碳源，玉米粉为有机物，主要为氮源，并提供能源。因此可推测该培养基适合于培养化能异养型微生物。（2）该培养基各组分的作用及其营养功能如下：
①可溶性淀粉可溶性淀粉主要作为培养基中的碳源和能源，供微生物生长所需。 ②玉米粉
玉米粉主要作为培养基中的氮源和能源，与微生物的生长发育密切相关。 ③磷酸二氢钾、硫酸镁
磷酸二氢钾、硫酸镁作为培养基中的无机元素，可调节胞内渗透压、酸碱度和氧化还原电势，同时也是微生物生长所必需的物质。 ④琼脂
琼脂作为培养基的凝固剂，使培养基凝固成固体状态，常用来观察、鉴定和分离纯化微生物。
⑤水 a．结合水是细胞物质的组成成分，是微生物细胞生活的必要条件。 b．游离水是细胞吸收营养物质和排出代谢产物的溶剂及生化反应的介质。 c．一定量的水分是维持细胞渗透压的必要条件。
d．水能有效地调节细胞内的温度。 e．微生物如果缺乏水分，则会影响代谢作用的进行。 （3）250mL试管斜面培养基的配制步骤如下：
①称取7.25g可溶性淀粉，6.25g玉米粉，1g磷酸氢二钾，0.5g硫酸镁， 5g琼脂溶于250mL水中，加热混合均匀。 ②调整pH为5.0。
③用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。 ④分装。制作斜面培养基时，每只15×150mm的试管，约装3～ 4mL（1/4～1/3试管高度）。
⑤分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。 ⑥灭菌。
⑦在实验台上放1支长0.5～1m左右的木条，厚度为1cm左右。将试管头部枕在木条上，使管内培养基自然倾斜，凝固后即成斜面培养基。
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