（2011 年）39．【生物 ——选修 1：生物技术实践】（15 分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏 造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题： （1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 上讲，该培养基属于
培养基。
和
。
。 。
和
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 （4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 无菌技术要求实验操作应在酒精灯 灭菌 火焰
（2013 年）39.[生物——选修 1：生物技术实践]
临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的 实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。 回答下列问题：
（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用_______法或_________法将样本借种于固体培养基表面，经过选 择培养、鉴别等步骤获得。
（2）取该单菌落适当稀释，用______法接种于固体培养基表面，在 37℃培养箱中培养 24h，使其均匀生长， 布满平板。
（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有 A，B，C，D 四种抗生素的滤纸片均匀置于该平 板上的不同位置，培养一段时间后，含 A 的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素 A_______；含 B 的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素 B_____；含 C 的滤纸片周围的透明圈比含 A 的小， 说明________；含 D 的滤纸片周围的透明圈也比含 A 的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的 情况下，此菌落很可能是抗生素 D 的________。
（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_______。 答案：（1）划线 A 弱
耐药菌
稀释涂布（或涂布） （4）A
（2）涂布
（3）敏感 不敏感 该致病菌对 C 的敏感性比对
为唯一碳源的固体培养基上，从功能
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈说明该菌株的降解能力
附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
39. 【答案】（1）原油 选择 （2）平板划线法 稀释涂布平板法 （3）强 （4）干热灭菌 高压蒸汽
（2012 年）39．（15 分）为了探究 6-BA 和 IAA 对某菊花品 种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在ＭＳ培养基中加 入 6-BA 和 IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接 种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条 件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率（m），以及 再生丛芽外植体上的丛芽平均数（n），结果如下表。 回答下列问题：
（１）按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为 类生长调节剂。
（２）在该实验中，自变量是 是
。
号培养基。
（填“6-BA”或“IAA”）。
，因变量是
，自变量的取值范围
和
两类。上述培养基中，6-BA 属于
（３）从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是 （４）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入
【答案】（１）大量元素 微量元素 细胞分裂素 （２）IAA 浓度 丛芽外植体的比率及丛芽平均数
０～０.５mg/L （３）１ （４）6-BA
（2010 年）37．【生物——选修模块 1：生物技术实践】(15 分)下列 是与芳香油提取相关的问题，请回答：
（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有 的性质。蒸馏时收集的蒸馏液 (是、不是)纯的玫瑰精油，原因 是
。
（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取 量的主要因素有蒸馏时间和 。当原料量等其他条件一定时，提 取量随蒸馏时间的变化趋势是
。
，原因 的地方，目的是
。
（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会 是 。 （4）密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度 适时间为
天左右。
（5）某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油时采摘花的最合 。 (6)从薄荷叶中提取薄荷油时 (能、不能)采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是
【答案】⑴易挥发、难溶于水、化学性质稳定 ；不是；玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水 混合物；（2）蒸馏温度 下降 学性质相似
在一定时间内提取量随蒸馏时间的延长而增加，一定时间后提取量不再增加；（3）
薄荷油和玫瑰精油的化
部分精油会随水蒸气挥发而流失；（4）较低 减少挥发；（5）a；（6）能
（2014 年）39．[生物——选修 1：生物技术实践]（15 分）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测 定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板 先行培养了一段时间，这样做的目的是
；然后，将 1mL 水样稀释 100 倍，在 3
个平板上用涂布法分别接入 0.1mL 稀释液；经适当培养后，3 个平板上的菌落数分别为 39、38 和 37。据此 可得出每升水样中的活菌数为
。
灭菌，在第二次及以
（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过 后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是
（3）示意图 A 和 B 中， 板法接种培养后得到的结果。
（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部 分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养 的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养 能提高培养液的 充分接触，提高
的含量，同时可以使菌体与培养液 的利用率。
3.8×107（2）灼烧； 营养物质
表示的是用稀释涂布平
。
【答案】（1）检测培养基平板灭菌是否合格 便获得单个菌落（3）B
⑷、溶解氧
将聚集的菌体逐步稀释以
（2013 新课标卷Ⅰ）39．回答下列有关泡菜制作的习题：
（1）制作泡菜是，所用盐水煮沸，其目的是
。为了缩短制作时间，有人还会在
冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是 。 （2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸菌的 中。
、 和 （3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 等。 （4）从开始
制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律 是 ，原因是 。 【答案】（1）消灭杂菌 增加乳酸菌含量 （2）无氧呼吸 细胞质 （3）温度、食盐用量、腌制时间 （4） 乳酸菌数量增加，杂菌数量较少 乳酸菌比杂菌更为耐酸
（2014 高考 1）39. 植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:
（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由 3 种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可 将 分解成 。
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR 可与纤维素形成 色复合物。用含有CR 的 该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。
（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见 下表）：
注：“+”表示有，“－”表示无。
据表判断，培养基甲 （填“能”或“不能”）用于分离和 鉴别纤维素分解菌，原 因
是 ；培养基乙 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原 因是 ；
不 【答案】（1）纤维二糖 葡萄糖 （2）红色 透明圈 （3）不 能 液体培养基不能分离单菌落
能 乙培养基中没有纤维素，不会形成 CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解 菌
（2015高考 I卷）39．[选修 1：生物技术实践]（15分）
已知微生物 A可以产生油脂，微生物 B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问 题：
（1）显微观察时，微生物 A 菌体中的油脂通常可用__________染色。微生物 A 产生的油脂不易挥发，可选 用_________（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样， 并应选用以___________为碳源的固体培养基进行培养。
（3）若要测定培养液中微生物 B 的菌体数，可在显微镜下用__________直接计数；若要测定其活菌数量， 可选用__________法进行计数。
（4）为了确定微生物 B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在 35℃、40℃、45℃温度下降 解 10g 油脂所需酶量依次为 4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了进 一步确定该酶的最适温度，应围绕_________℃设计后续实验。 【答案】（1）苏丹 III（或苏丹 IV） 萃取法 （2）油脂 （3）血细胞计数法 稀释涂布平板 （4）45 40
(2016 全国 2 卷)39．[生物——选修 1：生物技术实践]（15 分） 苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回 答下列为题：
（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。
图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的 _________________中进行，其产物乙醇与 _________________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的 ________________中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增值速度________________。
（2）第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用 类型，该过程需要在________________条件下才能完成。
（3）在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵 温度不同，第一阶段的温度________________（填“低于” 或“高于”）第二阶段。
冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是 。 （2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸菌的 中。
、 和 （3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 等。 （4）从开始
制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律 是 ，原因是 。 【答案】（1）消灭杂菌 增加乳酸菌含量 （2）无氧呼吸 细胞质 （3）温度、食盐用量、腌制时间 （4） 乳酸菌数量增加，杂菌数量较少 乳酸菌比杂菌更为耐酸
（2014 高考 1）39. 植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:
（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由 3 种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可 将 分解成 。
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR 可与纤维素形成 色复合物。用含有CR 的 该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。
（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见 下表）：
注：“+”表示有，“－”表示无。
据表判断，培养基甲 （填“能”或“不能”）用于分离和 鉴别纤维素分解菌，原 因
是 ；培养基乙 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原 因是 ；
不 【答案】（1）纤维二糖 葡萄糖 （2）红色 透明圈 （3）不 能 液体培养基不能分离单菌落
能 乙培养基中没有纤维素，不会形成 CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解 菌
（2015高考 I卷）39．[选修 1：生物技术实践]（15分）
已知微生物 A可以产生油脂，微生物 B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问 题：
（1）显微观察时，微生物 A 菌体中的油脂通常可用__________染色。微生物 A 产生的油脂不易挥发，可选 用_________（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样， 并应选用以___________为碳源的固体培养基进行培养。
（3）若要测定培养液中微生物 B 的菌体数，可在显微镜下用__________直接计数；若要测定其活菌数量， 可选用__________法进行计数。
（4）为了确定微生物 B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在 35℃、40℃、45℃温度下降 解 10g 油脂所需酶量依次为 4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了进 一步确定该酶的最适温度，应围绕_________℃设计后续实验。 【答案】（1）苏丹 III（或苏丹 IV） 萃取法 （2）油脂 （3）血细胞计数法 稀释涂布平板 （4）45 40
(2016 全国 2 卷)39．[生物——选修 1：生物技术实践]（15 分） 苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回 答下列为题：
（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。
图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的 _________________中进行，其产物乙醇与 _________________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的 ________________中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增值速度________________。
（2）第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用 类型，该过程需要在________________条件下才能完成。
（3）在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵 温度不同，第一阶段的温度________________（填“低于” 或“高于”）第二阶段。
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