制备提取高纯度积雪草总苷的相关工艺分析

２０１５年５月第１４卷第５期　Ｍａｙ　２０１５　Ｖｏ１．１４　Ｎｏ．５　今日健康　ＪＩＮ　ＲＩ　ＪＩＡＮ　ＫＡＮＧ　制备提取高纯度积雪草总苷的相关工艺分析　吴媛　（上海交通大学医学院附属第九人民医院，上海２０００１　１）　【摘要】　目的：分析提取高纯度积雪草总苷的相关制备工艺技术。方法：联合使用大孔树脂的分离技术和醋酸乙酯重结晶技　术，以提取纯度最高的积雪草总苷为指标考察制备工艺参数，并建立检测积雪草总苷含量的方法。结果：采用洗脱剂为７５％乙醇进行回　流提取，选用ＨＰＤ１００型的大孔树脂进行富集，最后采用醋酸乙酯重结晶技术，提取出含量为９０％ｘＸ．＿Ｅ的高纯度积雪草总苷。结论：该　项制备工艺方法重复利用性好、稳定性高、提取纯度高等优势，可用于实际工业生产中。　【关键词】　积雪草总苷　乙醇回流大孔树脂重结晶高纯度　积雪草在中药中是属于寒性药物，有解毒清热、消肿利湿的疗效，常　形式将溶液分别放置到三种不同型号的大孔树脂柱上，通过树　常用于治疗腹泻、黄疸、痈肿等疾病，在医学临床上也用于治疗肝炎、脑　脂柱的流量速度设置为０．５ＢＶ／ｈ。通过对比，得知型号为ＨＰＤ１００在积　膜炎等疾病，有调节机体免疫、抗氧化、抗肿瘤等功能，这都归功于积雪　雪草总苷的洗脱水平上效果最优。因此本文采用大孔树脂型号为　草中的活性成分三萜皂苷，其具有抑制细胞增生、抗肿瘤、抗氧化等　ＨＰＤ１００进行富集。　功效【】ｌ。本文主要是运用现代提取技术提取高纯度的积雪草总苷的相关　２．３．２洗脱剂乙醇体积分数选择　制备工艺技术进行分析和研究。　将积雪草水提取溶液平均分成３份，根据生药材和湿树脂比例为２：　１仪器与实验材料　１的形式将溶液分别放置到ＨＰＤ１００大孔树脂柱内，以此用浓度为　１．Ｉ仪器设备　４０％、５０％、７０％的乙醇同时以１　ＢＶ／ｈ的流量速度进行洗脱。通过一一　液相色谱仪为Ａｇｉｌｅｎｔｌ１００、二元梯度泵、电子称为ＭｅｔｔｌｅｒＡＥ　２４０、　比较，得知采用浓度为５０％的乙醇进行洗脱后提取出的羟基积雪草苷和　蒸馏器为ＳＹＺ—Ａ、旋转蒸发仪为Ｂｕｃｈｉ　Ｒ２１０、大孔树脂型有ＨＰＤ１００、　积雪草苷总量相对其他浓度的高。因此本文采用５０％的乙醇进行洗脱。　ＡＢ８、Ｄ１０１。　２．４重结晶技术　１．２实验材料　经过大孔树脂富集操作后，提取出的积雪草总苷其质量以达６５％左　积雪草的生产批号是２００８０９２０、２００８０９２６，对照品中羟基积雪草苷　右，为了提取更高纯度的积雪草总苷，接下来的工作就是纯化。通常在纯　生产批号是１　１０８９３—２００２０１、积雪草苷的生产批号是１　１０８９２—２００４０３、蒸　化操作中使用最多的就是结晶技术和萃取技术。其中，结晶技术有醋酸　馏水、甲醇、乙醇、醋酸乙酯、丙酮、正丁醇。　乙酯和丙酮，萃取技术是正丁醇，通过对这三种技术进行比较，选出最好　２方法与结果　的纯化方法。通过对比，醋酸乙酯的重结晶技术效果最佳，详细　２．１积雪草总苷含量检测方法　对比见表１。　２．１．１关于积雪草总苷提取液的制备　表１不同结晶技术对积雪草苷纯度的影响（ｒａｇ，％）　选取适量的积雪草总苷试验品，经Ｍｅｔｌｆｅｒ　ＡＥ　２４０电子称称量后记　录，外加甲醇适量制成总量为５　ｍｇｍｌ的积雪草总苷试验品，均匀混合后　醋酸乙醑绪晶　４．５８　４　３７　９３．１　丙酮结晶　３　７５　３．４８　７９．１　静置。　正丁醇葶取　３．８０　３．７９　９４．３　２．１．２关于对照品提取液的制备　３讨论　经电子称称出总量为１２．８的积雪草苷，１６‘８的羟基积雪草苷，分别　按照本文的分析报告，得出提取高纯度积雪草总苷的最好的制备工　用甲醇溶解后，放置于１０ｍｌ的计量瓶中，做好刻度标记。　艺技术为：积雪草药材通过浓度为７５％的乙醇进行回流提取，将乙醇的　２．２乙醇回流工艺技术　容量加大，加到１０倍的总量。分两次进行提取，每次提取的时间为一个　２．２．１总体回流提取　小时，将滤液进行减压后，浓缩到ｌｍｇ／ｒｎｌ，加４倍量的蒸馏水，混合后冷　根据积雪草总苷特有的物理性质，本文采用浓度为７５％的乙醇进行　藏，根据生药材和湿树脂比例为２：１的形式将溶液分别放置到ＨＰＤ１００　回流提取，详细做法是：将乙醇的容量加大，加到１０倍的总量。分两次进　大孔树脂柱内，将通过树脂柱的流量速度设置为０．５　ＢＷｈ，用５０％的乙　行提取，每次提取的时间为一个小时，将经过过滤操作后的乙醇　醇进行洗脱，流量速度设置为１　ＢＶ／ｈ，将洗脱好的溶液进行减压处理后　进行回收。　加甲醇溶解，最后加入８倍体积的醋酸乙酯溶解进行结晶。通过一些列　２．２．２除杂处理　的操作，可知，该项制备工艺技术用于提取积雪草总苷其具有重复利用　当使用体积分数相对高的乙醇进行提取时，可以提取到积雪草总苷　性好、稳定性高、提取纯度高等优势，可用于实际工业生产中。　和脂溶性物质，因此需要进行去除杂质处理。本文运用醇提水沉的工艺　技术，使得积雪草醇提取液浓缩到ｌｍｇ／ｍｌ。最后加４倍容量的蒸馏水，混　参考文献　合搅拌，然后提取离心液。　［１】陈俊，张小龙，杨时，原少伟，丁岗，王振中，萧伟．高纯度积雪草总苷的制备工艺研究　２．３大孔树脂富集工艺　Ⅱ】．中草药．２０１４，４５０）：５０４—５０５．　２＿３．１大孔树脂型号选择　［２］杜建平．孙冬梅．积雪草总苷大孔树脂纯化工艺研究Ｄ】．江西中医学院学报．２０１２，　根据相关的文献研究得知，苯乙烯型的大孔树脂对积雪草总苷中的　２４（２）：３９—４Ｏ．　主要活性成分三萜皂苷有很好的吸附分离作用。所以，本文中在选择大　孔树脂型号时采用ＨＰＤ１００、ＡＢ８和Ｄ１０１进行对比，选出最优的型号。　作者简介：吴媛，女，汉族，（１９８２—１０），上海杨浦区，单位：上海交通大学医学院附　属第九人民医院，本科学历，研究方向：中药学２０００１１　将积雪草水提取溶液平均分成３份，根据生药材和湿树脂比例为２：１的