血液标本在全自动血培养系统的临床应用探讨

４０８　Ｖｏ１．２４　Ｎ。．４　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｅｒｏｓｐａｃｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ａｐｒ　２０１３　３．３表皮样囊肿需与以下眼眶病变鉴别①皮样囊肿，皮　综上所述，掌握了表皮样囊肿的ＣＴ特征和其在眼眶　样囊肿除囊壁由鳞状上皮及纤维结缔组织组成外，囊内还　分布特点以及临床特征，ＣＴ可对大多数肿瘤做出准确的定　含有真皮、皮下组织和皮肤附件等物质；而表皮样囊肿壁　位及定性诊断。对少数呈软组织密度囊肿定性有一定困　不含皮肤附件结构。ＣＴ检查可见肿物与眶骨和骨缝的密　难，结合超声、ＭＲＩ检查，以明确位置及组织学特性，可提　切关系，眶骨有骨凹陷及骨嵴形成等特征性ＣＴ表现，成为　高诊断的准确率。　皮样囊肿的诊断特征　Ｊ。②皮脂腺囊肿，多见于青少年，　参考文献　由Ｚｅｉａｓ腺导管闭塞所引起的储留囊肿，囊壁由多层上皮　１尹佳园，温迎新，李辉．超声诊断右眼眶外表皮样囊肿　组成，囊内含一些皮脂及角化物质；ＣＴ表现类圆形低密度　ｌ例［Ｊ］．临床超声医学杂志，２０１０，１２（１０）：６５３．　肿物，增强扫描无强化。但仅从内含成分影像鉴别很难。　２周军．眼眶皮样囊肿的ＣＴ和ＭＲＩ诊断［Ｊ］．中国现代　③脂肪瘤，发生于眼眶少见，一般为边界清楚的低密度区，　医生，２００８，４６（６）：１３０～１３１．　ＣＴ值为一１００～一４０　Ｈｕ，密度均匀，有时可见曲线状、斑片　３　卜战云．超声ＣＴ　ＭＲＩ对眼眶皮样囊肿诊断价值比较　状钙化，而表皮样囊肿密度较脂肪瘤高。④泪囊囊肿，临　［Ｊ］．医药论坛杂志，２００７，２８（１２）：９７～９８．　床常有溢泪史，囊肿位于眶内泪囊窝处，内容物多为水样　（收稿日期：２０１２—１２—０５）　密度。　血液标本在全自动血培养系统的临床应用探讨　弋世交　摘要目的：通过对血液样本在全自动血培养系统的培养结果，探讨全自动血培养系统在血液感染的微生物种　类以及构成的临床应用价值。方法：用ＢＤ９１２０全自动血培养系统检测７　２８９份血液标本，对检出阳性的时间、阳　性率、假阳性、假阴性和细菌种类进行评估分析。结果：血液样本中最快阳性检出时间为２．１３　ｈ，在１２　ｈ、２４　ｈ、　４８　ｈ、７２　ｈ的阳性检出率分别为３７．７％、６ｌ｜Ｏ％、８２．１％、９６．３％。假阳性率为１．Ｏ％，假阴性率为Ｏ．２％。分离出　ｌ９属，１９种，共１１２６株病原微生物，阳性率为１５．４％，其中革兰氏阳性球菌６３２株（５６．１％），革兰氏阴性杆菌　３２６（２９．Ｏ％）占总检出率的８５．１％。结论：全自动血培养系统的临床应用提高了病原菌检出的阳性率，缩短了阳　性检出时间，检出细茵种类多，为败血症及严重感染的诊断和治疗提供快速准确的诊断依据。　关键词血液样本；全自动血培养系统；假阳性；革兰阴性　中图分类号：Ｒ４４６．１　文献标识码：Ａ　文章编号：２０９５—１４３４．２０１３．０４．０１３　Ｂｌｏｏｄ　Ｓｐｅｃｉｍｅｎ　ｉｎ　Ｆｕｌｌｙ　Ａｕｔｏｍａｔｉｃ　Ｂｌｏｏｄ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　Ｓｙｓｔｅｍ　Ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ　ｔｈｅ　Ｃｌｉｎｉ－　ｃａｌ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ＤＩＮＧ　Ｓｈｉｃａｉ　（Ｔｈｅ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　ｏｆＷｏｍｅｎ　ａｎｄ　Ｃｈｉｌｄｒｅｎ　ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆＱｕｊｉｎｇ　Ｃｉｔｙ，Ｙｕｎｎａｎ　６５５０００，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｈｒｏｕｇｈ　ｔｈｅ　ｂｌｏｏｄ　ｓａｍｐｌｅ　ｉｎ　ｆｕｌｌｙ　ａｕｔｏｍａｔｉｃ　ｂｌｏｏｄ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｓｙｓｔｅｍ　ｔｒａｉｎｉｎｇ　ｒｅｓｌｕｔｓ，ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ　ｄｉｓ－　ｃｕｓｓｅｓ　ｔｈｅ　ａｕｔｏｍａｔｉｃ　ｂｌｏｏｄ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｓｙｓｔｅｍ　ｉｎ　ｂｌｏｏｄ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｖａｌｕｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｕｓｉｎｇ　ＢＩＹ）１２０　ａｕｔｏｍａｔｉｃ　ｂｌｏｏｄ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｓｙｓｔｅｍ　ｔｅｓｔｉｎｇ　ｏｆ　７２８９　ｂｌｏｏｄ　ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ，ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｔｉｍｅ，ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒａｔｅ　ａｎｄ　ｆａｌｓｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｆａｌｓｅ　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｂｌｏｏｄ　ｓａｍｐｌｅ　ｆａｓｔｅｓｔ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ｉｓ　２．１３　ｈ，ｉｎ　１２　ｈ，２４　ｈ，４８　ｈ，７２　ｈ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗｅｒｅ　３７．７％，６１．Ｏ％，　８２．１％．９６．３％．Ｆａｌｓｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　１．０％，ｔｈｅ　ｆａｌｓｅ　作者单位：云南曲靖市妇幼医院检验科，曲靖６５５０００　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　０．２％．Ｓｅｐａｒａｔｅ　ｔｈｅ　１９　ｇｅｎｅｒａ　ａｎｄ　１９　ｓｐｅ—　第２４卷第４期　航空航天医学杂志　２０１３年４月４０９　ｃｉｅｓ，ａ　ｔｏｔａｌ　ｏｆ　１　１２６　ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ　ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ，ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　１５．４％，ａｍｏｎｇ　ｗｈｉｃｈ　ｇｒａｍ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｏｃｃｉ　６３２　ｓｔｒａｉｎｓ（５６．１％），ｇｒａｍ　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｂａｃｉｌｌｉ　３２６（２９．０％）ａｃｃｏｕｎｔｅｄ　ｆｏｒ　８５．１％ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　ｒａｔｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ：Ｆｕｌｌｙ　ａｕｔｏｍａｔｉｃ　ｂｌｏｏｄ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｓｙｓｔｅｍ　ｔｏ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｔｈｅ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｇｅｎ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒａｔｅ，ｓｈｏ￣ｅｎ　ｔｈｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ，ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｍｏｒｅ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｆｏｒ　ｓｅｐｓｉｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｔｒｅａｔ—　ｍｅｎｔ　ｏｆ　ｓｅｖｅｒｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｖｉｄｅｓ　ａ　ｒａｐｉｄ　ａｎｄ　ａｃｃｕｒａｔｅ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｂａｓｉｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ｂｌｏｏｄ　ｓａｍｐｌｅ；Ｆｕｌｌｙ　ａｕｔｏｍａｔｉｃ　ｂｌｏｏｄ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｓｙｓｔｅｍ；Ｆａｌｓｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ；Ｇｒａｍ—ｎｅｇａｔｉｖｅ　随着科学技术、医学的迅猛发展，广谱及超广谱的抗　生素在临床广泛应用…。使各类细菌的耐药性不断增强，　检出６８７株，占６１．Ｏ％，４８　ｈ内检出９２４株，占８２．１％，７２　ｈ　内检出１　０８４株，占９６．３％。各菌属检出情况见表１。　致细菌的培养难度增加。因此，血液细菌培养就成为危重　患者病情监测和血液微生物感染诊断的重要手段，但大多　数患者血液中细菌数量很低。所以，提高血培养的培养质　量，快速和准确的检测病原体对临床诊断和进行抗菌治疗　至关重要　Ｊ。现将检测临床血液标本的结果统计分析，以　探讨全自动血培养系统在血液感染的微生物种类以及构　成的临床应用价值。报告如下。　１资料与方法　１．１标本资料７２８９份血液培养标本来自２０１２—０３～　２０１３—０１间本院门诊、急诊以及住院发热或有全身感染的　患者。　１．２标本采集血液样本按常规方法进行；发热病人发热　初期或高峰期，最好在使用抗生素之前，采血后注入厌氧　培养瓶。对已经使用抗生素超过一周治疗者，采血后注入　需氧树脂瓶。其采血量成人每瓶８—１０　ｍＬ，儿童每瓶５～　８　ｍＬ，立即放人Ｂａｃｔｅｃ一９１２０系统孵育。　１．３方法与试剂仪器采用ＢＤ　９１２０全自动血培养系统　操作严格按照标准操作规程进行检测。ＢＤ　Ｐｈｏｅｎｉｘ一１００　全自动微生物鉴定药敏系统、标准菌株和培养瓶均为美国　ＢＤ公司提供。肺炎链球菌、白假丝酵母菌为临床株。　１．４　阳性瓶处理增菌系统自动报警为阳性时，观察生长　曲线并记录报警时间。常规步骤卸瓶，将菌种及时转接至　血或巧克力琼脂和麦康凯平板，将前两种平板置于５％～　８％ＣＯ　孵箱培养，麦康凯平板置于普通孵箱培养，２４　ｈ后　观察结果。对培养出的纯菌株用ＢＤ　Ｐｈｏｅｎｉｘ一１００全自动　微生物鉴定药敏系统进行鉴定。同时作直接涂片进行革　兰染色，并将涂片镜检结果通知临床，作为临床初步诊断　的依据。　１．５阴性瓶处理到设置时间（５　ｄ）系统报告阴性瓶，常　规步骤卸瓶，盲目将菌种转接至血或巧克力琼脂和麦康　凯，培养１８—２４　ｈ９５无细菌生长，方可报告血液培养无细　菌生长。　１．６质控菌株　白假丝酵母菌ＡＴＣＣ　９００２９、铜绿假单胞　菌ＡＴＣＣ　２７８５３、金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ　２５９２３、大肠埃希菌　ＡＴＣＣ　２５９２２由卫生部临床检验中心提供。　２结果　２．１阳性率及检出阳性时间在使用ＢＤ　９１２０全自动血　培养系统及配套培养瓶，对７　２８９份血液标本分离出１９属，　１９种，共１　１２６株病原微生物，阳性率为１５．４％。最快阳性　检出时间为２．１３　ｈ，在１２　ｈ内检出４２５株，占３７．７％，２４　ｈ内　表１各茵属检出情况　２．２检出菌株种类ＢＤ　９１２０系统检出细菌种类多，革兰　氏阳性细菌６３２株，占５６．１％，　葡萄球菌４９１株，占　４３．６％，革兰氏阴性细菌３６２株，占３２．１％，肠杆菌科细菌　１８９株，占１６．８％，菲发酵菌９８株，占８．７％，真菌６８株，占　６．Ｏ％，肺炎链球菌、草绿色链球菌、流感嗜血杆菌等苛养细　菌感染样本，均获得阳性结果。其菌株分布情况，见表２。　２．３　阳性结果报告方式　以微生物所生长的ＣＯ：累积的　方式报告阳性最高，占７８．３％；以单位时间内ＣＯ　产生速　度方式报告，即细菌在对数生长期被检出，占１６．３％，以变　化阈值方式报告，即血培养瓶在放入仪器检测前细菌生长　已超过阳性阈值，占５．６％。　２．４假阳性率在１　１２６份阳性样本中１１份仪器显示阳　性，但经涂片革兰氏染色未找到细菌及真菌，在经过培养　培１８～２４仍无细菌生长，方可报告血液培养无细菌生长。　假阳性率为１．０％。　２．５假阴性率在６　１６３份血液样本在ＢＤ　９１２０系统检出　为阴性中，经盲传分离出１３株菌，其中草绿色链球菌１株，　流感嗜血杆菌２株，热带念珠菌４株，*滑念球菌２株，　新型念球菌１株，铜绿假单胞菌２株，饱曼不动杆菌２株，　假阴性率０．２％。　４１０　Ｖｏ１．２４　Ｎｏ．４　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｅｒｏｓｐａｃｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　表２菌株分布　Ａｐｒ　２０１３　３讨论　基中的葡萄糖（部分非发酵菌）、或糖代谢能力弱（真菌），　或抽血量少使菌量太少，或由于种种原因使苛氧细菌死亡　不足以激发荧光系统等都可导致假阴性　。因此，常规培　ＢＤ９１２０检测系统采用荧光探测自动检测技术以及各　种有利于细菌生长的环境，连续测定封闭培养瓶内微生物　代谢　。具有操作简单，可视化程度高，ＷＩＮＤＯＷ操作界　面，软件功能齐全，可提供各种辅助信息，包括细菌生长风　线，有效鉴别假阳性培养等特点　；独特的ｃ０　或ＣＯ　浓　度变化技术，快速检测出血液和其他标本中是否感染细　菌、真菌及分枝杆菌　Ｊ。本检测结果显示，最快阳性检出　时间为２．１３　ｈ，在１２　ｈ内检出４２５株，占３７．７％，２４　ｈ内检出　养系统不论报告阳性还是阴性，都一定要进行涂片和转　种，进一步确认样本检出结果的准确性。　综上所述，当人体发生病原菌感染时，微生物入侵血　液并迅速繁殖在血液中就能检测到病原微生物。因此对　血液培养就至关重要，不仅把其作为临床微生物检测最重　要的项目，而且对感染疾病的诊断、病情与疗效监测有重　６８７株，占６１．０％，４８　ｈ内检出９２４株，占８２．１％，７２　ｈ内检　出１　０８４株，占９６．３％。说明该检测系统能够缩短了阳性检　出时间，进而缩短临床医生对感染病人的初步诊断时间，　要价值。采用全自动血培养系统进行鉴定，能够为提高病　原菌检出的阳性率，缩短阳性检出时间，检出细菌种类多，　为败血症及严重感染的诊断和治疗提供快速准确的诊断　依据。　为疾病早治疗提供指导性依据。　当培养瓶内有微生物生长释放出ＣＯ　，与含有荧光染　料的感应器作用，促使感应器内的荧光物质吸收后发出荧　光　Ｊ。仪器中探测器将每１０　ｍｉｎ／１次连续检测培养瓶中　的荧光强度，绘出微生物生长曲线，一旦培养瓶内达到一　定量的荧光，仪器发出阳性提示，并据此确定为阳性瓶。　本检测结果显示，对７　２８９份血液标本分离出１９属，１９种，　共１　１２６株病原微生物，阳性率为１５．４％。说明本检测系统　参考文献　１周庭银，编著．临床微生物学诊断与图解［Ｍ］．第２　版．上海：上海科学技术出版社，２００７．２１０—２５４．　２叶应妩，王毓三，申子瑜，主编．全国临床检验操作规程　［Ｍ］．第３版．南京：东南大学出版社，２００６．７２～８６．　３周樱，钱厚明，刘文娟，等．Ｂａｃｔｅｃｇｌ２０全自动血培养仪　的假阳／假阴结果及常见故障的研究［Ｊ］．中国医学装　备，２００６，３（２）：４８～４９．　的树脂能够吸附抗生素，振摇功能使血液标本阳性率由以　往３．６０％提高到现在的１５．４％左右，提高了阳性率，使肺　炎链球菌、嗜血杆菌等苛氧细菌均获阳性结果。检出细菌　种类多，革兰氏阳性细菌６３２株，占５６．１％，葡萄球菌４９１　株，占４３．６％，革兰氏阴性细菌３６２株，占３２．１％，肠杆菌　科细菌１８９株，占１６．８％，菲发酵菌９８株，占８．７％，真菌　６８株，占６．Ｏ％，肺炎链球菌、草绿色链球菌、流感嗜血杆菌　等苛养细菌感染样本，均获得阳性结果。说明本检测系统　能够满足临床常规检测需求。　４　Ｍｕｒｒａｙ　ＰＲ．Ｍａｎｕａｌ　０／Ｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｍｉｃｒｏｂｉｌｏｇｙ［Ｊ］．９ｔｈ　ｅｄ．　Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ：ＡＳＭ　Ｐｒｅｓｓ，２００７，１２０１—１２４８．　５　中国合格评定国家认可委员会．ＣＮＡＳ—ＧＬ２３：２００８　医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验　领域的指南【Ｍ　Ｉ．２００８．　６李超，周铁丽．ＭｉｎｉＶＩＴＡＣ全自动血液培养仪假阳性／　假阴性结果分析［Ｊ］．检验医学，２００４，１９（２）：１２０～　１２１．　１１２６份培养标本中１１例假阳性，涂片和培养均未见细　菌生长，假阳性率为１．０％。后证实该样本为糖尿病或白　７徐英春，倪语星，王金良，主编．血培养操作规范［Ｍ］．　上海：上海科学技术出版社，２００２．１２５～１６０．　血病病人　，主要是由于病人代谢旺盛或白细胞太高而大　量产生的ＣＯ：，近而干扰荧光物质使系统显示假阳性。　６　１６３份培养标本中１３例假阴性，假阴性率为０．２０％。由　于各种原因使ＣＯ　产生减少，原因可能是细菌不利用培养　８王瑶，徐英春，谢秀丽．两种血培养系统的需氧与厌氧　瓶对模拟菌血症标本检测能力的对比研究［Ｊ］．中华检　验医学杂志，２００７，３０（５）：５８２～５８７．　（收稿日期：２０１２—１２—２８）