(时间：90分钟 满分：100分)
1．(12分)(2016届山西省四校联合模拟)近年来，纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品。请分析回答下列问题：
(1)在果醋制作时，醋酸菌在________和糖源供应充足时，可将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸，请写出该过程的化学反应式：____________________________。
(2)腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。用盐腌制时，应注意控制________；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在________%左右。
(3)制作泡菜的原理是：________________________________。
(4)蔬菜在腌制过程中，会产生亚硝酸盐。在________条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生________反应后，与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成________色染料。
解析：本题考查果醋、腐乳、泡菜制作的相关知识，意在考查考生的理解分析能力。(1)醋酸菌为需氧型微生物，其可将糖、酒精经一系列反应生成醋酸，在果醋制作时，如果氧气、糖源充足，醋酸菌能将糖分解为醋酸；如果糖源不充足，醋酸菌将利用酒精生成醋酸，其化学方程式为：C2H5OH＋O2―→CH3COOH＋H2O。(2)腐乳制作过程中，加盐腌制时应注意控制食盐的用量；配制卤汤时，要将卤汤中酒的含量控制在12%左右，若酒精含量过高会延长腐乳成熟的时间，若酒精含量过低，则不足以杀菌。(3)制作泡菜利用了乳酸菌的无氧呼吸产生乳酸的特性。(4)蔬菜在腌制过程中，会产生亚硝酸盐，在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红染料。
答案：(1)氧气 C2H5OH＋O2―→CH3COOH＋H2O (2)盐的用量 12 (3)乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖，将葡萄糖分解成乳酸 (4)盐酸酸化 重氮化 玫瑰红
2．(12分)(2016届哈师大附中等模拟)自1964年印度科学家培养曼陀罗花药获得单倍体植株后，花药离体培养技术发展迅速。据记载，现在已经有250多种高等植物的花药培养成功。
(1)组培中，常采用________培养基，主要包括的成分有水、大量元素、________、有机物，还需要添加植物激素。
(2)细胞分裂素和生长素的使用顺序和用量会影响到植物细胞的发育方向。如为了有利于细胞分裂而不分化，两种激素的使用顺序为：________。花粉植株产生的途径有两种：一种是花粉脱分化形成愈伤组织，另一种是形成________。
(3)进行月季花药离体培养一般选择在五月初到五月中旬。对于花粉而言，要采用________期的花粉，为了鉴定该时期的花粉，常采用醋酸洋红法进行染色鉴定。若是某些植物花粉细胞不易着色，常采用________法染色，能将花粉的细胞核染成________色。
(4)消毒后的花蕾，在无菌条件下除去萼片与花瓣，剥离花药时，尽量不要损伤花药，同时要将________彻底去除。
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解析：本题考查植物组织培养的相关知识，意在考查考生的识记理解能力。(1)通常用MS固体培养基进行植物组织培养。其主要成分包括水、大量元素、微量元素、有机物和植物激素等。(2)生长素和细胞分裂素的使用顺序和浓度比值影响外植体的发育过程。如先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂，但细胞不分化。花粉植株一般有两条产生途径，一种是花粉通过胚状体阶段发育为植株，另一种是先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。(3)月季花药离体培养，一般要采用单核期的花粉，通常采用醋酸洋红法或焙花青—铬矾法对花粉发育时期进行鉴定。(4)在剥离花药时要尽量不损伤花药。但与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成，所以还要彻底除去花丝。
答案：(1)MS固体 微量元素 (2)先生长素，后细胞分裂素 胚状体 (3)单核(单核居中到单核靠边) 焙花青—铬矾 蓝黑 (4)花丝
3．(15分)(2016届郑州市高三模拟)牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况，也影响奶制品的运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中，混合均匀，如此再重复2次。请回答下列有关问题：
(1)巴氏消毒法的处理方法为________，使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是____________________。
(2)取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布，应选择的涂布工具是下图中的________。
(3)图中所示方法为稀释培养法，理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为35个、33个、34个，则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值________(填“偏大”或“偏小”)，原因是____________________________。
(4)消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死，若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量，则在操作步骤上应做什么改动？________。
(5)从生牛奶取样培养得到的菌落中，混有各种杂菌，从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加入________，菌落具有________的特征的可以认定为大肠杆菌。
解析：本题考查微生物培养的相关知识，意在考查考生的理解分析能力。(1)巴氏消毒的方法是在70～75 ℃煮30分钟(80 ℃煮15分钟)，用这种方法对生鲜牛奶进行消毒，可以杀死牛奶中的微生物，并且使
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牛奶的营养成分不被破坏。(3)由图分析可知，对菌落进行计数前共对生鲜牛奶稀释了10倍，对所得菌落34×106
数求平均值，可得生鲜牛奶中每毫升含细菌数为＝3.4×10个；因个别菌落可能是由2个或多个细
0.1菌形成，故运用这种方法统计的结果比实际值偏小。(4)当细胞数量减少时应减少稀释次数。(5)培养大肠杆菌的培养基中加入伊红美蓝，菌落呈现有金属光泽的紫色或黑色。
答案：(1)70～75 ℃煮30分钟(80 ℃煮15分钟) 可以杀死牛奶中的微生物，并且使牛奶的营养成分不被破坏 (2)B (3)3.4×10 偏小 个别菌落可能是由2个或多个细菌形成 (4)稀释次数减少 (5)伊红美蓝 金属光泽的紫色或黑色
4．(10分)(2016届山东烟台高三模拟)玫瑰精油是制作高级香水的主要成分，提取玫瑰精油的工业流程如图所示，请根据图回答问题：
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(1)玫瑰精油生产过程中所用的原料是________。
(2)使用水蒸气蒸馏的原理是____________________。玫瑰精油生产过程中②步骤中具体的蒸馏方法是________蒸馏。
(3)为了把玫瑰精油从乳浊液中分离需加入________。如果需要进一步除去油层的水分，需加入________吸水。
(4)优质的玫瑰是玫瑰精油高产优质的保障。厂家发现一株含玫瑰油高的优质玫瑰，想快速培育成玫瑰林，你给他们提供的生物技术是________。
(5)利用上述生物技术快速培育玫瑰幼苗时，外植体消毒用的是体积分数为70%的________；在培养基中调配的生长素和细胞分裂素用量的比值低时利于________。
解析：本题考查玫瑰精油的提取及植物组织培养的相关知识，意在考查考生的理解分析能力。玫瑰精油是用玫瑰花瓣通过水中蒸馏的方法提取的。该方法的原理是利用水蒸气将挥发性强的植物油携带出来。向蒸馏所得到的油水混合物中加入NaCl可以使油水分层，加入无水硫酸钠可以进一步吸去水分。快速繁殖的方法是利用植物组织培养技术可以实现植物优良品种的快速繁育。利用该技术育苗过程中，需用70%的酒精对外植体进行消毒。调整培养基中的生长素与细胞分裂素的比值可调节脱分化与再分化过程，生长素与细胞分裂素用量的比值低时利于芽的分化。
答案：(1)玫瑰花瓣 (2)利用水蒸气将挥发性强的植物油携带出来 水中 (3)NaCl 无水硫酸钠 (4)植物组织培养 (5)酒精 芽的分化
5．(12分)(2016届吉林实验中学高三质检)回答下列有关从生物材料中提取某些特定成分的问题： (1)薄荷油和玫瑰精油的化学性质相似，因此适合选用________法来提取。用此方法收集到的液体________(是/不是)纯的薄荷油，原因是__________________________________。在此过程中，影响薄荷油提取量的主要因素有________和________。
(2)从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是________法。用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉
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碎、干燥、萃取、________、________。
(3)如图是某同学对萃取的胡萝卜素样品所做的鉴定实验的结果。图中实验组是________，实验得出的结论是______________________________。
解析：(1)薄荷油和玫瑰精油都是芳香油，具有易挥发、难溶于水、化学性质稳定等性质。因此可用水蒸气蒸馏法进行提取。由于薄荷油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水混合物，不是纯的薄荷油。蒸馏温度太高、时间太长，产品品质就比较差。(2)胡萝卜素易溶于有机溶剂，可用有机溶剂进行萃取，步骤是：粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩。(3)由于标准样品中只含胡萝卜素，萃取样品不纯，所以实验组是B、C，对照组是A、D。根据图中的实验结果可知萃取样品中不含β胡萝卜素。
答案：(1)水蒸气蒸馏 不是 薄荷油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水混合物 蒸馏时间 蒸馏温度 (2)萃取 过滤 浓缩 (3)BC 萃取样品中不含β胡萝卜素
6．(12分)(2016届甘肃兰州一中高三模拟)某年我国某地由于柑橘大实蝇的危害，橘农遭受到了很大的损失，当地政府想尽一切办法帮助橘农尽量减少损失。
(1)有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是________法。
(2)橘皮精油的提取若采取水蒸气蒸馏法，会出现原料________和有效成分________等问题。 (3)某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，通常选取________作材料进行植物组织培养，大量繁殖无病毒植株。若用花药进行离体培养，则选择花粉发育至________期的花药培养成功率最高。确定花粉发育时期最常用的方法有________法，某些植物的花粉不易着色，需采用________法。
(4)影响植物组织培养的因素有很多，其中最关键的激素有________。请解释橘树上的细胞不离体便不能长成完整植株的根本原因：________________________________________________________。
解析：(1)(2)由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，使用水中蒸馏法又会产生原料焦糊的问题，故一般采用压榨法。(3)培育无病毒植株常选取茎尖(或根尖)作实验材料，因为茎尖(或根尖)几乎无病毒。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧，此时期花药培养成功率最高。若选择单核期以前的花药，质地细嫩，极易破碎，而单核期以后的花药花瓣有些松动，又给材料的消毒带来困难。确定花粉发育时期最常用的方法是醋酸洋红法，若某些植物的花粉不易着色，需采用焙花青—铬矾法，这类方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。(4)植物组织培养时最关键的激素是生长素和细胞分裂素；在进行植物组织培养时需保证细胞处于离体状态，原因是在柑橘个体发育过程中，不同细胞中遗传信息执行情况不同，细胞分化形成不同的组织和器官。
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答案：(1)压榨 (2)焦糊 水解
(3)茎尖 单核 醋酸洋红 焙花青—铬矾
(4)生长素、细胞分裂素 在柑橘个体发育过程中，不同细胞中遗传信息执行情况不同，细胞分化形成不同的组织和器官
7．(12分)(2016届保定模拟)果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，常用于果汁的生产。请结合所学知识回答下列问题：
(1)果胶酶用于果汁生产，是因为它能________果胶，可解决果汁浑浊和________等问题。 (2)果胶酶主要包括：多聚半乳糖醛酸酶、________和________。
(3)某同学利用固定化酶反应柱进行澄清苹果汁的生产实验，装置图如下：
固定化酶既能与反应物接触，又能与反应物分离，可以________，其制作方法有________、________和________，该同学利用的是________。
解析：本题主要考查酶的应用，意在考查考生的理解分析能力。(1)根据教材知识可知酶具有专一性，果胶酶的作用是分解果胶，有利于解决果肉出汁率低和果汁浑浊等问题。(2)果胶酶并不是特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，主要包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。(3)固定化酶既能与反应物接触、又能与反应物分离，因此可以反复利用，其制作方法有物理吸附法、化学结合法和包埋法，题图所示装置利用的是物理吸附法。
答案：(1)分解 果肉出汁率低 (2)果胶分解酶 果胶酯酶 (3)反复利用 物理吸附法 化学结合法 包埋法 物理吸附法
8．(15分)(2016届辽宁沈阳五中模拟)请回答下列有关生物技术实践的问题：
(1)为从土壤中筛选能有效降解有机化合物X的细菌，研究人员用化合物X、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能高效降解化合物X的细菌(目的菌)，该培养基为________培养基，其中有机化合物X为目的菌提供________等营养要素。在分离、纯化、计数过程中，则常采用________法接种，实验过程中还需配制空白培养基作为对照，其目的是
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(2)在提取胡萝卜素时，常用的萃取剂具有沸点高且________的特点。在鉴定胡萝卜素粗品时，常用________法，如果标准样品只形成一种色素带，而提取样品形成了多种色素带，其原因可能是
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________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
(3)用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时，用________洗涤红细胞，用________破裂红细胞使血红蛋白得以释放，如果装填的凝胶色谱柱中出现气泡，气泡会________，降低分离效果。
解析：(1)土壤中有多种微生物，由于用化合物X、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能高效降解化合物X的细菌(目的菌)，所以该培养基为选择培养基，由于微生物的生长需要水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，所以化合物X为目的菌提供碳源和氮源等营养要素。在分离、纯化、计数过程中，则常采用稀释涂布平板法接种。实验过程中还需配制空白培养基作为对照，其目的是验证培养基灭菌是否彻底或检测培养基平板灭菌是否合格。(2)在提取胡萝卜素时，常用的萃取剂具有沸点高且水不溶性或不与水混溶等特点。在鉴定胡萝卜素粗品时，常用纸层析法，如果标准样品只形成一种色素带，而提取样品形成了多种色素带，其原因可能是提取样品中含多种胡萝卜素。(3)用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时，用生理盐水洗涤红细胞以维持细胞正常形态，用蒸馏水和甲苯会破裂红细胞使血红蛋白得以释放，如果装填的凝胶色谱柱中出现气泡，气泡会搅乱洗脱次序，降低分离效果。
答案：(1)选择 碳(C)源和氮(N)源 稀释涂布平板 验证培养基灭菌是否彻底或检测培养基平板灭菌是否合格
(2)水不溶性或不与水混溶 纸层析 提取样品中含多种胡萝卜素 (3)生理盐水 蒸馏水和甲苯 搅乱洗脱次序
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