岛津LC-2010A型高效液相色谱仪操作规程

岛津LC-2010A型高效液相色谱仪操作规程

1．环境要求

温度应相对稳定，一般应控制在15～25ºC，室内保持恒温。相对湿度最好为50～70%。

2．开机准备

2． 1检查仪器的使用登记记录，了解前一次的使用情况是否处于正常状态。上机操作人员需认真阅读过本标准操作程序，并经上机前操作培训。 2． 2本机应处于正常状态，且在计量认证的有效期限内。

2． 3仪器超过一年必须送计量部门或有资格的单位复检，合格后方可使用。

3．操作步骤

3．1使用者必须了解仪器的工作原理，熟知注意事项，在掌握基本操作后，才能上机。

3．2 操作前的准备 3．2．1 流动相的制备

用高纯度的试剂配制流动相，必要时照紫外分光光度法进行溶剂检查，应符合要求；水应为新鲜制备的超纯水，可用超级纯水器制得或用重蒸馏水。凡规定pH值的流动相，应使用精密pH计进行调节。配制好的流动相应通过适宜的0.45um滤膜滤过，用前脱气。应配制足量的流动相及时待用。 3．2．2 供试溶液的配制

供试品用规定溶剂配制成供试溶液。定量测定时，对照品溶液和样品供试溶液均应分别配制2份。供试溶液在注入色谱仪前，一般应经适宜的0.45um滤膜滤过。必要时，在配制供试溶液前，样品需经提取净化，以免对色谱系统产生污染或对色谱干扰。

3．2．3 检查上次使用记录和仪器状态

检查色谱柱是否适用于本次试验，色谱柱进出口位置是否与流动相的流向一致，原保存溶剂与现用流动相能否互溶，流动相的pH值与该色谱柱是否相适应，仪器是否完好，仪器的各开关位置是否处于关断的位置。 3．3 测定前的准备工作

3．3．1打开LC-2010A及二极管阵列检测器的电源，等待仪器自检通过后，打开电脑，双击桌面LCsolution图标，出现以下界面：

在线系统（Online） 离线系统（Offline）

用于编辑方法 数据处理

3．3．2选择在线系统，出现登陆界面：

默认用户名为Admin，点OK后进入在线系统，此时系统自动连接仪器，仪器发出蜂鸣音,表示连接成功，出现在线控制主界面：

工具栏 信号采集窗口 仪器状态显示 功能选择栏 仪器控制栏

3．3．3在仪器控制栏中更改方法，将方法另存后，点击“Download”按钮，发送方法到仪器，点击工具栏中的

按钮，将仪器打开，此时进样器、泵、柱温

箱、检测器都开始按方法中的设置运行。

3．3．4单针进样 待基线平衡（按

按钮可将基线归零，等同于“Balance”）及信号采集窗口左

上角出现绿色的“Ready”标志后，选择功能选择栏中的项，点击[Single

Strat ]图标进入单针进样设置，如下图：

所有样品信息输入完毕，检查无误后，点击“OK”就开始进样。

3．3．5序列进样

选择功能选择栏中的 项，点击[Wizard ]图标 进入序列进样设置向导，出现如下设置界面，按图中标注设置序列参数，完成后点击下一步进入下一界面，最后点击完成，结束向导设置。

样品数量 只有待测样品 只有对照品 待测样品及对照品 包括标准品

插入用于有关物质及最低检测限测定的样品

对照品名称 对照品序号

自动添加序号

数据保存路径及名称

不同浓度点数量 对照品数 每一对照品进样数

开始之前清除所有标准曲线 自动打印报告

样品名称 样品序号

数据保存路径及名称

每一样品瓶数 每一样品进样数

自动打印报告

设置结束，将序列表另存后，点击[Batch Start]图标 即可。

（在序列运行当中如需要对未运行序列表项目进行修改、添加，可按

[Pause/Restart]暂停序列，待修改结束后再按一次，序列即可恢复运行） 3．3．6数据处理

3．3．6．1待进样结束，数据采集完毕后，打开“Postrun”即可编辑数据。界面如下：

3．3．6．2如果实验时只记录了紫外检测器的数据，就点击左侧紫外数据分析图标，再按存盘路径找到记录的色谱数据，双击打开。

3．3．6．3点击“Analyze”图标，可更改积分参数，修改完毕后，点击“Data Report”即可输出数据报告，将其打印即可。 3．3．7关机

清洗柱子后，在主窗口点击工具栏中的“Instrument On/Off”按钮，将仪器关闭，关闭计算机及仪器的电源开关。

4．用毕处理

4.1 清洗柱子。 4.2 关闭仪器。 4.2 登记使用记录本。

5．注意事项

5.1 色谱柱与进样器及其出口端与检测器之间应为无死体积连接，以免试样扩散影响分离。

5.2 新柱或被污染柱用适当溶剂冲洗时，应将其出口端与检测器脱开，避免污染。 5.3 使用的流动相应与仪器系统的原保存溶剂能互溶，如不互溶，则先取下上次的色谱柱，用异丙醇冲洗过滤，进样器和检测器的流通池也注入异丙醇进行过渡，过渡完毕后，接上相应的色谱柱，换上本次使用的流动相。

5.4 压力表无压力显示或压力波动时不能进行分析，应检查泵中气泡是否已排除，各连结处有无漏液，排除故障后方能进行操作。如压力升高，甚至自动停泵，应检查柱端有无污染堵塞，可小心卸开柱的进口端螺帽，挖出被污染填冲剂后，补入同类填充剂，仔细安装好，再进行操作。

5.5 发现记录基线波动，出现毛刺等现象，首先应检查检测器流通池中是否有气泡或污染，如不是流通池引起，可等待氘灯稳定，同时检查仪器的接地是否良好，必要时，换上新的氘灯。仪器稳定后方能进行操作。

5.6 进样前，色谱柱应用流动相充分冲洗平衡，如系统适用性不符合规定，或填充剂已损坏，则应更换新的同类色谱柱进行分析，由于同类填充剂的化学键合相的键合度及性能等存在一定差异，往往依法操作达不到预定的分离时，可更换另一牌号的同类色谱柱进行试验。

5.7 以硅胶作载体的化学键合相填充剂的稳定性受流动相pH值的影响，使用时，应详细参阅该柱的说明书，在规定的pH值范围内选用流动相，一般pH值范围为(2.5～7.5)。使用高pH值流动相时，可在泵与进样器之间连接硅胶短柱，以饱和流动相，保护分析柱，并尽可能缩短在高pH值下的使用时间，用后立即冲洗。 5.8 各色谱柱的使用应予登记，应包括本次测试样品及柱中的保存溶剂。色谱流路系统，从泵、进样器、色谱柱、到检测器流通池，在分析完毕后，均应按充分冲洗，特别是用过含盐流动相的，更应注意先用水，再用甲醇—水，充分冲洗。如发现泵漏液等较严重的情况，应请有经验的维修人员进行检查，维修。

6．维护与保养

6.1 仪器应按计量部门规定定时检定，并有专人保管，负责维护保养。 6.2 经常保持仪器清洁，请使用中性洗涤剂或无水乙醇浸湿的棉花擦洗。注意，不要让液体渗到仪器内部。擦完后，再用一块干燥的棉花擦干。 6.3 仪器不能随意移动。